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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3274
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-05-19
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3274 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
節(jié)桿菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Arthrobacter spp. | LZR3274 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
青霉FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Flammulina velutipes
大腸埃希菌FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit拉丁屬名: coli
牛瘟病毒FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Rinderpest virus
芽孢桿菌VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
異常漢遜酵母PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula anomala
蘇云金芽孢桿菌錫盧亞種FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
甲基桿菌屬VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Methylobacterium organophilum
根瘤菌TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit用途: 固氮
寄生曲霉PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus parasiticus
偽假蒼黃菌EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoclavibacter helvolus
多主葡萄殼菌ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
無(wú)二酸檸檬酸桿菌ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Citrobacter amalonaticus
木賊鐮孢菌EIPS2 (Estrogen Induced Protein pS2) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium equiseti
香菇EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Lentinula edodes
節(jié)桿菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原瓜子金皂苷己Polygalasaponin F中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C53H86O23 分 子 量: 1090.24
CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原大果桉醛 HMacrocarpal-H對(duì)照藥材 分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136
CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原4-甲基七葉亭4-Methyl-6,7-dihydroxycoumarin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H8O4 分 子 量: 192.16812
TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽熊果苷Arbutin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H16O7 分 子 量: 272.25
TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3（抗原）相思子堿(S)-2-Amino-3-(1-methyl-1H-indol-3-yl)propanoic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H14N2O2 分 子 量: 218.25176
TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2（多肽抗原）人參皂苷Rb1ginsenoside rb1中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C54H92O23 分 子 量: 1109.29
Thymosin Alpha-1 胸腺肽 α-1 （胸腺肽-Thymosin alpha-1）異姜花素DIsocoronarin D對(duì)照藥材 分 子 式: C20H30O3 分 子 量: 318.4504
