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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
無(wú)漿體(無(wú)形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3263
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-07-11
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3263
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

無(wú)漿體(無(wú)形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Anaplasma spp.

LZR3263

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

產(chǎn)色葡萄球菌Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus chromogenes

變異鹽單胞菌Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas variabilis

裂褶菌PIAS1 (Protein Inhibitor of Activated STAT 1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物

沙壤土桿菌PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ELISA Kit拉丁屬名: Ramlibacter sp.

東方伊薩酵母PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Issatchenkia  orientalis

蘇云金芽胞桿菌COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  thuringiensis

大腸埃希氏菌SAG (S Antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

果生鏈核盤菌THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructigena Honey

NitriliruptorTDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁屬名: Nitriliruptor sp.

葡萄座腔菌TBP (TATA Binding Protein) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

馬賽菌TAF (TATA Box Binding Protein/TBP-Associated Factors) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia  niastensis

谷氨酸棒桿菌TAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

短波單胞菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas staleyi

草菇TAF13 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 13) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
無(wú)漿體(無(wú)形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)臭矢菜素C9H-Pyrano[2,3-f]-1,4-benzodioxin-9-one,2,3- dihydro-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)- 2-(hydroxymethyl)-5-methoxy-,(2R,3R)-rel- 對(duì)照藥材 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.3781

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)  一氧化氮合成酶-1(抗原)三十碳六烯-2,3-二醇6,10,14,18,22-Tetracosapentaene-2,3-diol,2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E)- (8CI,9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268

NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible  一氧化氮合成酶-2(抗原)艾納香素4H-1-Benzopyran-4-one,

2-(3,5-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-, (2S)-對(duì)照藥材 分 子 式: C16H14O6 分 子 量: 302.27876

Batroxobin  蛇毒巴曲酶抗原氯化鈉溶液(5mol/L,無(wú)菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS  一氧化氮合成酶-3(抗原)SSPE緩沖粉劑(20×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NPY ( Neuropeptide Y)  神經(jīng)肽 Y(抗原)白樺脂醇Betulin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.72

NR2B (Glutamate receptor)  谷氨酸受體(抗原)等效-9-羥基-15-氧代-19-異貝殼杉烷酸ent-9-Hydroxy-15-oxo-19-kauranoic acid對(duì)照藥材 分 子 式:  分 子 量:

 


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