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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3263
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-07-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3263 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
無(wú)漿體(無(wú)形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Anaplasma spp. | LZR3263 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
產(chǎn)色葡萄球菌Smad7/MADH7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus chromogenes
變異鹽單胞菌Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas variabilis
裂褶菌PIAS1 (Protein Inhibitor of Activated STAT 1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
沙壤土桿菌PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ELISA Kit拉丁屬名: Ramlibacter sp.
東方伊薩酵母PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
蘇云金芽胞桿菌COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
大腸埃希氏菌SAG (S Antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
果生鏈核盤菌THP (Tamm–Horsfall Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructigena Honey
NitriliruptorTDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁屬名: Nitriliruptor sp.
葡萄座腔菌TBP (TATA Binding Protein) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
馬賽菌TAF (TATA Box Binding Protein/TBP-Associated Factors) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia niastensis
谷氨酸棒桿菌TAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
短波單胞菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas staleyi
草菇TAF13 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 13) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
無(wú)漿體(無(wú)形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak（多肽）臭矢菜素C9H-Pyrano[2,3-f]-1,4-benzodioxin-9-one,2,3- dihydro-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)- 2-(hydroxymethyl)-5-methoxy-,(2R,3R)-rel- 對(duì)照藥材 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.3781
NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 一氧化氮合成酶-1（抗原）三十碳六烯-2,3-二醇6,10,14,18,22-Tetracosapentaene-2,3-diol,2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E)- (8CI,9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268
NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible 一氧化氮合成酶-2（抗原）艾納香素4H-1-Benzopyran-4-one,
2-(3,5-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-5-hydroxy-7-methoxy-, (2S)-對(duì)照藥材 分 子 式: C16H14O6 分 子 量: 302.27876
Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗原氯化鈉溶液(5mol/L,無(wú)菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 一氧化氮合成酶-3（抗原）SSPE緩沖粉劑(20×)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
NPY ( Neuropeptide Y) 神經(jīng)肽 Y（抗原）白樺脂醇Betulin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.72
NR2B (Glutamate receptor) 谷氨酸受體（抗原）等效-9-羥基-15-氧代-19-異貝殼杉烷酸ent-9-Hydroxy-15-oxo-19-kauranoic acid對(duì)照藥材 分 子 式: 分 子 量:
