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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3278
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-07-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3278 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Aspergillus nidulans | LZR3278 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
禾谷絲核菌PKN1 (Protein Kinase N1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
伊平屋橋大洋芽孢桿菌PKIα (Protein Kinase Inhibitor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Oceanobacillus iheyensis
白僵菌PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治
交鏈孢霉PKIγ (Protein Kinase Inhibitor Gamma) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
奈瑟菌PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Neisseria meningitidis
金龜子綠僵菌PTK (Protein Tyrosine Kinase) ELISA Kit用途: 生物防治
谷氨酸棒桿菌PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
釀酒酵母PP (Protein Phosphatase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
腐生葡萄球菌腐生亞種PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母PRSS1 (Protease, Serine, 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
喜肌費(fèi)爾酵母PRSS12 (Protease, Serine 12) ELISA Kit 拉丁屬名: Fellozyma inositophila
橄欖鏈霉菌PR3Ab (Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces olivaceus
青紫黑鏈霉菌PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Syntrophomonas glaucovioatratus
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34PCI (Protein C Inhibitor ) ELISA Kit 規(guī)格: 1ml
乳微桿菌PLP (Proteolipid Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）臺氏液粉劑(Tyrode's Solution,無鈣)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Insulin protein (Active) 重組人細(xì)胞因子堿性磷酸酶封閉液(Levamisole法)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Trk C 神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）植物酸性磷酸酶(ACP)提取試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT) 促甲狀腺素受體（抗原）珠子草素1,3-Benzodioxole,6-[(2R,3R)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-bis(methoxymethyl)butyl]-4-methoxy-,rel-對照藥材 分 子 式: C24H32O7 分 子 量: 432.50668
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原吉馬替康Gimatecan中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H25N3O5 分 子 量: 447.4831
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲狀腺素受體（抗原）鹽酸利多卡因2-(Diethylamino)-N-(2,6-dimethylphenyl)acetamide hydrochloride hydrate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H22N2O.HCl.H2O 分 子 量: 288.8135
TY3H ( Tyrosine Hydroxylase ) 酪氨酸羥化酶（抗原）4-表-莪術(shù)醇4-Epi-curcumenol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
