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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
莫氏巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3297
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-07-11
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3297
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

莫氏巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

Babesia motasi

LZR3297

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

多主葡萄殼菌CDSN (Corneodesmosin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

短密青霉CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium brevi-compactum

黑曲霉CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger

香菇CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黑曲霉CNTN4 (Contactin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  niger

釀酒酵母CNTNAP1 (Contactin Associated Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

梨輪紋病菌CNTNAP4 (Contactin Associated Protein 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌ELMO2 (Engulfment And Cell Motility 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

草分枝桿菌Des (Desmin) ELISA Kit拉丁屬名: Mycobacterium phlei

線殼囊孢(座線孢)SSRP1 (Structure Specific Recognition Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

百脈根中間根瘤菌HP (Haptoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Mesorhizobium loti

煙色齒耳HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

櫟金錢菌TNNT1 (Troponin T Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

反硝化鹽單胞菌TNPO2 (Transportin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas denitrificans

薄層菌屬UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Hymenobacter  roseosalivarius
莫氏巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor)  降鈣素受體樣蛋白抗原木栓酮Friedelin中藥標準品  分 子 式: C30H50O 分 子 量: 426.7174

cRaf/Raf1(c-raf 1)  cRaf/Raf1抗原甘草酸二鉀Glycyrrhizicaciddipotassiumsalt, hydrate脂肪酸類 分 子 式: C42H60O16-2.2[K+] 分 子 量: 899.112800000001

MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1)  MEK1/MAPKK1抗體(N-端)雀舌黃楊堿BBuxbodine B對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

CRF (Corticotropin-Releasing Factor)  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子氧化芍藥苷Oxypaeoniflora中藥標準品  分 子 式: C23H28O12 分 子 量: 496.46

CSIG(cellular senescence inhibited gene)  細胞衰老抑制基因抗原25-脫水澤瀉醇A;澤瀉醇GDammara-13(17),25-dien-3-one,11,23,24-trihydroxy-, (8a,9b,11b,14b,23S,24S)-中藥標準品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量:

Cripto-1(N-Terminus)  衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)N端ABTS試劑標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Cripto-1(C-Terminus)  衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)C端銀杏酚酸中藥標準品  分 子 式:  分 子 量: 


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