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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

大腸埃希氏菌NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

猴頭菌—50043L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

米羅布里格小單孢菌NT-3 (Neurotrophin-3) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora mirobrigensis

米曲霉NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus Oryzae

蘇云金芽孢桿菌NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner

大腸埃希菌NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

西西布哈加瓦氏菌NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bhargavaea cecembensis

谷氨酸棒狀桿菌ATCC13032NPHN (Nephrin) ELISA Kit規格: 冰袋泡沫盒快遞

米根霉GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit用途: 飼料用酶的篩選

慢生根瘤菌GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮良好

變異短波單胞菌GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas variabilis

多粘芽孢桿菌GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus polymyxa

美澳型核果褐腐病菌GDF10 (Growth Differentiation Factor 10) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

黑曲霉GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  niger

平菇GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
箭毒蛙壺菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商HA tag  HA tag標簽多肽紅細胞洗滌液(pH7.2)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

HA tag(map)  HA tag標簽（分支多肽）穿心蓮內酯苷2(3H)-Furanone,3-[2-[(1R,4aS,5R,6R,8aS)-5-[(b-D-glucopyranosyloxy)methyl]decahydro-6-hydroxy-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxy-,(3E,4S)-對照藥材 分 子 式: C26H40O10 分 子 量: 512.5898

HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1)  肝細胞生長因子激活物抑制因子抗原氯化飛燕草素-3-O-葡萄糖苷1-Benzopyrylium, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-,chloride (1:1)化學標準品 分 子 式: C21H21O12+.Cl- 分 子 量: 500.83724

HBA1(hemoglobin alpha 1)  人類血紅蛋白α1抗原甲基當藥寧1,8-Dihydroxy-2,6-dimethoxy-9H-xanthen-9-one中藥標準品  分 子 式: C15H12O6 分 子 量: 288.25218

VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing)  病毒X蛋白(HBxAg)抗原鹽酸藥根堿Jatrorrhizine Hydrochloride。化學標準品 分 子 式: C20H20NO4 分 子 量: 373.84

URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)  病毒X蛋白(HBxAg)抗原花旗松素Taxifolin中藥標準品  分 子 式: C15H12O7 分 子 量: 304.25

URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal  肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原山柰酚-3-O-蕓香糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-[[6-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-中藥標準品  分 子 式: C27H30O15 分 子 量: