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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
敗血波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3336
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-05-16
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3336
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

敗血波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Bordetella bronchiseptica

LZR3336

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

豇豆慢生根瘤菌HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit用途: 與綠葉、銀葉山螞蝗共生固氮

嗜熱鏈球菌HBβ (Hemoglobin Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

新疆鹽地桿菌屬HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinibacterium  xinjiangense

桃色枝頂孢HO2 (Heme Oxygenase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Acremonium persicinum

腸桿菌屬PC (Plasma Anticoagulant Protein C) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

游動球菌屬PS (Plasma Anticoagulant Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: Planococcus  halocryophilus

膠孢SEPP1 (Selenoprotein P, Plasma) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Herbaspirillum canarienseHA (Hemagglutinin) ELISA Kit拉丁屬名: Herbaspirillum canariense

檸檬假絲酵母SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida citrea

*杏葉斑鏈格孢ALB (Albumin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

青霉屬SAA (Serum Amyloid A) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium  sp.

孟氏假單胞菌SEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

石面單胞菌CR1 (Complement Receptor type 1) ELISA Kit拉丁屬名: Epilithonimonas  sp.

摩洛哥芽孢桿菌MFG-E8 (Milk Fat Globule EGF Factor 8) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

巨大芽胞桿菌SERT (Serotonin Transporter ) ELISA Kit 用途: 分類、研究,具有 固氮生物肥料潛力。
敗血波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2)  脂蛋白磷脂酶A2抗原3-鄰(6-脫氧-beta-D-吡喃葡萄糖苷) 28-O-beta-D-吡喃葡萄糖雞納酸酯Quinovic acid 3-O-(6-deoxy-beta-D-glucopyranoside) 28-O-beta-D-glucopyranosyl ester對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

Lgr5/GPR49  腸上皮干細(xì)胞蛋白(多肽)*緩沖液(5×,pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

LH(Luteinizing Hormone)  促黃體生成素抗原洛伐他汀Lovastatin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C24H36O5 分 子 量: 404.53964

LH(Luteinizing Hormone)  人促黃體生成素(多肽)乙酰升麻醇-3-O-α-L-阿拉伯糖苷Acetyl Cimigenol-3-O-α-L-arabinopyranside中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C37H58O10 分 子 量: 662.86

LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor)  人促黃體生成素受體抗原交讓木定6-Oxabicyclo[3.2.1]octane-2,7-diol,1,5- dimethyl-8-[2-[octahydro-8-methyl-5-(1- methylethyl)-4,8,3a-[1,2,4]butanetriylcyclopent- [b]indol-8a(4aH)-yl]ethyl]-,2-acetate,[3aR- (3aR,4R,4aa,5a,8R,8aR,8bR,10S*)]-[partial]- 對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

L-HDC (L-Histidine decarboxylase)  L-組氨酸脫羧酶抗原核酸預(yù)雜交液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

LIF peptide  抑制因子抗原D-異抗壞血酸D-Isoascorbic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H8O6 分 子 量: 176.12 


聯(lián)系方式
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