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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3393
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-05-16
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3393 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
克柔念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Candida krusei | LZR3393 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
DeinococcusGDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus sp.
哈茨木霉GDF10 (Growth Differentiation Factor 10) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淡紫擬青霉GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鐮刀菌GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 用途: 教學(xué)科研
發(fā)酵乳桿菌Grb2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus fermentum
球毛殼Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium globosum
乳桿菌屬Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
黃色籃狀菌Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Talaromyces flavus
果生鏈核盤菌GH2 (Growth Hormone 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
浸麻類芽胞桿菌GHRH (Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit用途: 產(chǎn)酮、乙
草酸青霉CAM (Calmodulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum
黃曲霉HP (Haptoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus
釀酒酵母HSF1 (Heat Shock Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
腸桿菌HSP-20 (Heat Shock Protein 20) ELISA Kit用途: 微生物肥料
克柔念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒 HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β （抗原）12,13-去氫苦參堿12,13-didehydromatridin-15-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22N2O 分 子 量: 246.34798
IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)澳洲茄胺solasodine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H43NO2 分 子 量: 413.64
CD54/ICAM-1 細(xì)胞間粘附分子-1HEPES緩沖液(1×HMF,無鎂)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β（白細(xì)胞介素-1β）(多肽抗原)Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白（抗原）蔗糖咪唑溶液(1.65mol/L,pH7.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
IL-6(Interleukin-6) 白介素6（白細(xì)胞介素-6）(多肽抗原)黃芪甲苷ASTRAGALOSIDE中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C41H68O14 分 子 量: 784.97
IL-10(Interleukin-10) 白介素10（白細(xì)胞介素-10）(抗原)柚皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷Naringenin-7-O-glucuronide 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20O11 分 子 量: 448.3769
