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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3401
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-05-16
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3401 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
犬病毒32型探針法熒光定量PCR試劑盒 | Canine Influenza Virus H3N2（CIV-H3N2） | LZR3401 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
印度芽孢桿菌IL-27 (Interleukin 27) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus indicus
枯草芽孢桿菌IL-35 (Interleukin 35) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
棘孢木霉IL-2R (Interleukin-2 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma asperellum
外皮毛霉IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母IMA (Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
阿爾通山堿線菌IL-32 (Interleukin 32) ELISA Kit 拉丁屬名: Natrinema altunense
發(fā)根土壤桿菌IL18BP (Interleukin 18 Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Agrobacterium rhizogenes
芽孢桿菌屬AR (Amphiregulin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
矩圓黑盤孢KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
假單胞菌LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas prosekii
海水鹽單胞菌LTF/LF (Lactoferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas aquamarina
膜醭畢赤酵母LN (Laminin) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia membranifaciens
卷枝毛霉LDL-IC (Low Density Lipoprotein Immune Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides
釀酒酵母LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
犬病毒32型探針法熒光定量PCR試劑盒 P63 protein P63 抑制基因（抗原）*泊苷Etoposide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H32O13 分 子 量: 588.56
OPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨素(多肽抗原)紅景天苷Salidroside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H20O7 分 子 量: 300.31
OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保護(hù)蛋白配體(抗原)石松靈堿Lycodoline中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H25NO2 分 子 量: 263.3752
P311 protein 相關(guān)蛋白（抗原）葡萄糖-磷酸鹽緩沖液(G-PBS)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷酸多聚酶抗原α-亞麻酸(9Z,12Z,15Z)-Octadeca-9,12,15-trienoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H30O2 分 子 量: 278.4296
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（人：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪素、 又稱：前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素氯化鉀溶液(3.5mol/L,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素BS固定液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
