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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3414
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-05-16
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3414 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Capripox Virus | LZR3414 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種PTGES (Prostaglandin E Synthase, Microsomal) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
繡色土生單胞菌PTGS1 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Terrimonas pekingense
白鬼筆PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
叢毛紅曲PG-F (Prostaglandin F) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus pilosus
惡臭假單胞菌PSA (Prostate Specific Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas putida
斑污擬盤多孔孢PAP (Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
間型酒香酵母PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 用途: 用于釀酒生香
麥根腐平臍孺孢PRSS1 (Protease, Serine, 1) ELISA Kit 拉丁屬名: polaris sorokiniana
大腸埃希菌PROC (Protein C) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
嗜果刀孢PDIA3 (Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit 拉丁屬名: Stigmina carpophila
LysobacterPDI (Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit 拉丁屬名: Lysobacter flagellatus
成團泛菌PIAS1 (Protein Inhibitor Of Activated STAT 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pantoea agglomerans
枯草芽孢桿菌PICK1 (Protein Interacting With Protein Kinase C, Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
總狀毛霉PKBg (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor racemosus
新疆鹽地桿菌PKB (Protein Kinase B) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
羊痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ER α 雌激素受體α抗體胞苷Cytidine中藥標準品 分 子 式: C9H13N3O5 分 子 量: 243.21662
CKLFSF2/CMTM2 趨化素樣因子超家族成員2抗體側(cè)金盞花醇Adonitol碳水化合物 分 子 式: C5H12O5 分 子 量:
152.14
COX7A2 細胞色素c氧化酶VIIA亞型2抗體25-羥基原人參二醇中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
CKLFSF2 isoform 1 趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體PBS磷酸鹽粉劑(0.01mol/L,pH7.2-7.4)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
MAP65/ASE 1 擬南芥MAP65蛋白抗體Beta-咔啉-1-丙酸9H-Pyrido[3,4-b]indole-1-propanoicacid對照藥材 分 子 式: C14H12N2O2 分 子 量: 240.25728
Streptavidin/SA protein 鏈酶親和素抗體葛根素puerarin脂肪酸類 分 子 式: C21H20O9 分 子 量: 416.38
human Serum IgA 人血清型免疫球蛋白A抗體補骨脂定Psoralidin中藥標準品 分 子 式: C20H16O5 分 子 量: 336.33804
