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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
麥芽香肉桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3416
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3416
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

麥芽香肉桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Carnobacterium maltaromaticum

LZR3416

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

貪噬菌屬PTPRN (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit  拉丁屬名: Variovorax    ginsengisoli

賴氨酸芽孢桿菌PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit  拉丁屬名: Lysinibacillus mangiferihumi

奇異球菌PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit  拉丁屬名: Deinococcus sp.

膠紅酵母PARC (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa

大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○154SPA (Pulmonary Surfactant Associated Protein A) ELISA Kit  規(guī)格: 1ml

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit  拉丁屬名: equi subsp.zooepidemicus

冷海水黃桿菌PDHa (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit  拉丁屬名: Flavobacterium  frigidimaris

暗產(chǎn)色鏈霉菌*PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit  拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes

亮白曲霉PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit  拉丁屬名: Aspergillus candidus

枇杷葉點霉PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase-E1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

膠柱頭孢霉屬PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Paenibacillus taichungensisM2-PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

植物乳桿菌PK (Pyruvate Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

大腸埃希氏菌Qa-2 (Qa Lymphocyte Antigen 2 Region) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

深藍(lán)紫色桿菌RAPGEF2 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Janthinobacterium  lividum
麥芽香肉桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD71/TFR/Transferrin receptor  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體L-羥脯氨酸(2S,4R)-4-Hydroxypyrrolidine-2-carboxylic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H9NO3 分 子 量: 131.12986

GAPDH(3E12)-Loading Control  3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)Hanks平衡鹽粉劑(1×HBSS,含酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GAPDH   3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體(內(nèi)參抗體)4’-去甲基去氫鬼臼毒素化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

beta-Actin (Loading Control)  β-肌動蛋白抗體(內(nèi)參抗體)橙皮素7-O-葡萄糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,7-(b-D-glucopyranosyloxy)-2,3-dihydro-5-hydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-,(2S)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H24O11 分 子 量: 464.41936

14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon)  14-3-3蛋白抗體堪非醇 3-O-阿拉伯糖苷4H-1-Benzopyran-4-one, 3-(α-L-arabinopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-對照藥材 分 子 式: C20H18O10 分 子 量: 418.35092

phospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58)  磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體豬去氧膽酸Hyodeoxycholic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C24H40O4 分 子 量: 392.58

14-3-3 family protein  蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)印烏堿化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

 


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