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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
波薩達斯球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3461
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3461
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

波薩達斯球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Coccidioides posadasii

LZR3461

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

宋內氏志賀氏菌51592F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit規格: 凍干粉

謝瓦曲霉fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus chevalieri

*蜜環菌FSH (Follicle Stimulating Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

紫穗槐根瘤菌FUCA (Alpha-L-Fucosidase, Tissue) ELISA Kit用途: 與紫穗槐共生固氮

白地霉GNb1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum  candidum

魯氏不動桿菌GLβ (Galactosidase, Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter lwoffii

繩狀籃狀菌FASN (Fatty Acid Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces funiculosus

青霉菌GAL (Galanin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

乳酸乳球菌乳脂亞種GAL1 (Galectin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp. cremoris

球孢鏈霉菌高加索變種GAL2 (Galectin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces globisporus var. caucasicus

產氨短桿菌GAL3 (Galectin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes (Cooke and Keith) Breed

運動發酵單胞菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Zymomonas  mobilis

杜搟氏菌GAL7 (Galectin 7) ELISA Kit拉丁屬名: Duganella phyllosphaerae

豌豆根瘤菌GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit用途: 與豌豆共生固氮

淡紫灰鏈霉菌GAL9 (Galectin 9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
波薩達斯球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒 USP3  去泛素化酶3抗體氨茶堿Aminophylline化學標準品 分 子 式: 2(C7H8N4O2).C2H8N2 分 子 量: 420.43

ATXN3L  小腦脊髓蛋白3抗體蝙蝠葛新諾林堿Dauricinoline中藥標準品  分 子 式: C37H42N2O6 分 子 量: 610.73918

Endomucin  內皮粘蛋白EMCN抗體藤黃酸Morellic acid化學標準品 分 子 式: C33H36O8 分 子 量: 560.63414

KLK3/Prostate Specific Antigen  激肽釋放酶3/舒素3抗體蛋白銀染試劑盒標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

H5N1-H5  H5亞型全病毒抗體19,20-(E)-瓦來薩明堿2,5-Ethano-2H-azocino[4,3-b]indole-6-carboxylicacid, 4-ethylidene-1,3,4,5,6,7-hexahydro-6-(hydroxymethyl)-, methyl ester,(2R,4E,5S,6S)-化學標準品 分 子 式: C20H24N2O3 分 子 量: 340.41616

Newcastle disease virus  雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)抗體交讓木堿1-Propanone,1-[(1R,4R,5S)-1,4-dimethyl-2,8-dioxabicyclo[3.2.1]oct-4-yl]-3-[(3aR,4S,4aS,5R,8S,8aR,8bS,10S)-octahydro-8-methyl-5-(1-methylethyl)-4,8,3a-[1,2,4]butanetriylcyclopent[b]indol-8a(4aH)-yl]-對照藥材 分 子 式: C30H47NO3 分 子 量:

CD3 epsilon  CD3抗體小檗堿Berberine中藥標準品  分 子 式: C20H18NO4+ 分 子 量: 336.36122


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