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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3467
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-05-16
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3467 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
短古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Cooperia curticei | LZR3467 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸桿菌SHH (Hedgehog Homolog, Sonic) ELISA Kit 用途: For replication of R6K plasmids. 用于構(gòu)建大腸桿菌突變株。
PseudoxanthomonasHHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoxanthomonas sp.
絨奧德蘑HLTF (Helicase Like Transcription Factor) ELISA Kit 用途: 食用
斑點青霉Hp-IgG (Helicobacter Pylori IgG) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
耐寒短桿菌HO-1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌HO-2 (Heme Oxygenase 2) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。
炭疽健康皮張抗原HPX (Hemopexin) ELISA Kit 規(guī)格: 10ml
凝結(jié)芽胞桿菌HSPG (Heparan Sulphate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus coagulans
巨大芽孢桿菌HPA (Heparanase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium
雅致放射毛霉HBEGF (Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomucor elegans
解淀粉芽孢桿菌HC II (Heparin Cofactor II) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
微小根毛霉LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizomucor pusillus
根瘤菌HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit 用途: 固氮
畢赤酵母HNF1a (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Alpha) ELISA Kit 用途: 表達(dá)脂肪酶
斯瓦特貝赫山克里布所菌HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Kribbella swartbergensis
短古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Calponin 1/2/3 鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體L（-）巖藻糖L-(-)-Fucose碳水化合物 分 子 式: C6H12O5 分 子 量: 164.15648
SORBS2/ArgBP2 精氨酸結(jié)合蛋白2抗體檜脂素，灑維寧Hibalactone對照藥材 分 子 式: C20H16O6 分 子 量:
SLC40A1/FPN1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體23-羥基白樺酸23-HYDROXYBETULINIC ACID中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972
TGF beta 3 轉(zhuǎn)移生長因子β3（TGFβ3）抗體楮樹黃酮醇B2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-methoxy-6,8-bis(3-methylbut-2-en-1-yl)-4H-chromen-4-one化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H28O7 分 子 量: 452.49632
TGF beta 1/LAP 轉(zhuǎn)化生長因子β（TGFβ）抗體(E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二苯乙烯3-Methoxy-5-styrylphenyl acetate對照藥材 分 子 式: C17H16O3 分 子 量: 268.30714
TGF beta 2 轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGFβ2）抗體8-乙酰甲基二氫勒樘堿8-Acetonyldihydroavicine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
MCSF/M-CSF 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體11β-羥基黃體酮Pregn-4-ene-3,20-dione,11-hydroxy-, (11b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H30O3 分 子 量:
