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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
短古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3467
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3467
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

短古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Cooperia curticei

LZR3467


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

大腸桿菌SHH (Hedgehog Homolog, Sonic) ELISA Kit 用途: For replication of R6K plasmids. 用于構建大腸桿菌突變株。

PseudoxanthomonasHHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoxanthomonas sp.

絨奧德蘑HLTF (Helicase Like Transcription Factor) ELISA Kit 用途: 食用

斑點青霉Hp-IgG (Helicobacter Pylori IgG) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

耐寒短桿菌HO-1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

圈卷產色鏈霉菌HO-2 (Heme Oxygenase 2) ELISA Kit用途: 代謝產物具有抗菌活性。

炭疽健康皮張抗原HPX (Hemopexin) ELISA Kit 規格: 10ml

凝結芽胞桿菌HSPG (Heparan Sulphate Proteoglycan) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus coagulans

巨大芽孢桿菌HPA (Heparanase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium

雅致放射毛霉HBEGF (Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomucor elegans

解淀粉芽孢桿菌HC II (Heparin Cofactor II) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens

微小根毛霉LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizomucor pusillus

根瘤菌HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit 用途: 固氮

畢赤酵母HNF1a (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Alpha) ELISA Kit 用途: 表達脂肪酶

斯瓦特貝赫山克里布所菌HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Kribbella swartbergensis
短古柏線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Calponin 1/2/3  鈣結合蛋白Calponin抗體L(-)巖藻糖L-(-)-Fucose碳水化合物  分 子 式: C6H12O5 分 子 量: 164.15648

SORBS2/ArgBP2  精氨酸結合蛋白2抗體檜脂素,灑維寧Hibalactone對照藥材 分 子 式: C20H16O6 分 子 量:

SLC40A1/FPN1  細胞膜鐵轉運蛋白FP1抗體23-羥基白樺酸23-HYDROXYBETULINIC ACID中藥標準品  分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.69972

TGF beta 3  轉移生長因子β3(TGFβ3)抗體楮樹黃酮醇B2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-methoxy-6,8-bis(3-methylbut-2-en-1-yl)-4H-chromen-4-one化學標準品 分 子 式: C26H28O7 分 子 量: 452.49632

TGF beta 1/LAP  轉化生長因子β(TGFβ)抗體(E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二苯乙烯3-Methoxy-5-styrylphenyl acetate對照藥材 分 子 式: C17H16O3 分 子 量: 268.30714

TGF beta 2  轉化生長因子β2(TGFβ2)抗體8-乙酰甲基二氫勒樘堿8-Acetonyldihydroavicine化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

MCSF/M-CSF  巨噬細胞克隆刺激因子抗體11β-羥基黃體酮Pregn-4-ene-3,20-dione,11-hydroxy-, (11b)-化學標準品 分 子 式: C21H30O3 分 子 量:

 


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