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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3480
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-07-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3480 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
反芻獸考德里氏體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Cowdria ruminantium | LZR3480 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
構(gòu)巢曲霉OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus nidulans
李季倫氏環(huán)桿菌GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Cyclobacterium lianum
紫色游動放線菌GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes violaceus
藍(lán)綠小四孢菌OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
根瘤菌ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
百脈根中間根瘤菌OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mesorhizobium loti
黑曲霉ON (Osteonectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
納西桿菌屬OPN (Osteopontin) ELISA Kit 拉丁屬名: Naxibacter
乳酸乳球菌乳亞種OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
棘孢曲霉ACH (Acetylcholine) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus aculeatus
絳紅鏈霉菌OVA SIgM (Ovalbumin Specific IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces purpureus
表皮葡萄球菌OVA sIgE (Ovalbumin specific Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus epidermidis
色鹽桿菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit拉丁屬名: Chromohalobacter pacificum
球形賴氨酸芽孢桿菌Tryptophan Hydroxylase 1(TPH1) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
粗糙脈孢菌OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Neurospora crassa
反芻獸考德里氏體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD200/MOX1 膜糖蛋白CD200抗體巨豆三烯酮4-(But-2-en-1-ylidene)-3,5,5-trimethylcyclohex-2-enone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H18O 分 子 量: 190.28142
CD66c/CEACAM6 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體異石當(dāng)歸素Isosaxalin對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
CPA1/Carboxypeptidase A 胰羧肽酶A1抗體五水合硫酸司巴丁(-)-Sparteine sulfate pentahydrate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H26N2.H2O4S 分 子 量: 332.45882
CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2抗體STM溶液(2M,pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CPB1/Carboxypeptidase B1 胰羧肽酶B1抗體4'-O-甲基葛根素4'-O-Methylpuerarin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H22O9 分 子 量: 430.40468
CPEB1 細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體(-)-荷包牡丹堿甲氯化物1,3-Dioxolo[4,5-g]isoquinolinium,5-[(6S)-6,8-dihydro-8-oxofuro[3,4-e]-1,3-benzodioxol-6-yl]-5,6,7,8-tetrahydro-6,6-dimethyl-,chloride (1:1), (5R)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20NO6+.Cl- 分 子 量: 417.8396
Cystatin E/M 半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體11-羰基-Β-乙酰乳香酸Acetyl-11-keto-beta-boswellic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H48O5 分 子 量: 512.72052
