91亚洲欧美-91亚洲欧美综合高清在线-91亚洲区国产区精品区-91亚洲视频在线-91亚洲视频在线观看-91亚洲综合

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

pBIFC-VC155IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit規(guī)格: 1ml甘油管1支，20ul質(zhì)粒，一般次日下午

南方靈芝TGF-βR (Transforming Growth Factor Receptor) ELISA Kit用途: 食用

大腸埃希氏菌TGF-α (Transforming Growth Factor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

岸濱芽孢桿菌GP4/CD36 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus litoralis

福士擬莖點霉TGF-β2 (Transforming Growth Factor Beta 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Phomopsis fukushii

盤菌屬TGF-β3 (Transforming Growth Factor Beta 3) ELISA Kit用途: 食用

西班牙糖絲菌TGFβI (Transforming Growth Factor Beta Induced) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharothrix espanaensis

臺灣根霉TSC22 (Transforming Growth Factor Beta Stimulated Protein Clone 22) ELISA Kit  拉丁屬名: Rhizopus  formosensis

葡萄汁酵母TG (Transglutaminase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  uvarum

黏液桿菌屬TMED1(Transmembrane Emp24 Domain Containing Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucilaginibacter  rigui

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS23TNPO1(Transportin 1) ELISA Kit 規(guī)格: 1ml

釀酒酵母TTR (Transthyretin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

擬康氏木霉TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma atrovirideTrichoderma pseudokoningii

米曲霉TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

大球蓋菇TREM-1 (Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豬囊尾蚴探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SERPING1/C1 Inactivator  酯酶抑制蛋白C1IN抗體烏藥醚內(nèi)酯LINDERANE中藥標準品  分 子 式: C15H16O4 分 子 量: 260.29

Alpha 2 antiplasmin   α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體丙二酰染料木苷4H-1-Benzopyran-4-one,7-[[6-O-(carboxyacetyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-5-hydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)-中藥標準品  分 子 式: C24H22O13 分 子 量:

SOX9/SRA1  轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體小白菊內(nèi)酯parthenolide中藥標準品  分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.32

Thyroxine Binding Globulin/TBG/Serpin A7  甲狀腺素結(jié)合球蛋白抗體尼索地平3-Isobutyl 5-methyl 2,6-dimethyl-4-(2-nitrophenyl)-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylate中藥標準品  分 子 式: C20H24N2O6 分 子 量: 388.41436

phospho-SOX9(Ser181)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體黃芩素 6-O-葡萄糖苷6xi-D-Glucopyranosyloxy-5,7-dihydroxy-2-phenyl-chromen-4-on化學(xué)標準品 分 子 式: C21H20O10 分 子 量: 432.378

H3-K4-HMTase SETD7  組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體女貞甙Ligustroside對照藥材 分 子 式: C25H32O12 分 子 量: 524.51438

Slitrk1  神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體脫甲氧基脫乙酰土荊皮乙酸demethoxydeacetoxypseudolaric acid B中藥標準品  分 子 式: C20H24O7 分 子 量: 376.40036