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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3418
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-07-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3418
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格

Cephalosporium spp.

LZR3418

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

金黃殼囊孢S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit   注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

海角副球菌S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit  拉丁屬名: Paracoccus homiensis

擬莖點霉S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

平田頭菇S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

廣島鏈霉菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis

硬桿菌SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter     scleromae

果生鏈核盤菌sPLA2 (Screted Phospholipase A2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

異常漢遜酵母變種SCT (Secretin) ELISA Kit  拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala (Hansen) H. et P.

芬娜冬菇sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Flammulina fennae

枯草芽胞桿菌枯草亞種SEPP1 (Selenoprotein P) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

特異青霉(產黃青霉)SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit  拉丁屬名: Penicillium notatum Westling

血痕韌革菌STK (serine/threonine protein kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鹽古桿菌SAA (Serum amyloid A) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema  sp.

高盧蜜環菌SESN1 (Sestrin 1) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

球孢白僵菌SESN2 (Sestrin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Beauveria bassiana
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格eIF4EBP1/4EBP1  eIF4E結合蛋白抗體大麻烯Canniprene對照藥材 分 子 式: C21H26O4 分 子 量: 342.42874

phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64)  磷酸化4E結合蛋白1抗體商陸皂苷辛esculentoside H中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

phospho-eIF4EBP1(Thr37/46)  磷酸化4E結合蛋白1抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH4.8,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70)  磷酸化eIF4E結合蛋白抗體對羥基苯甲醛4-Hydroxybenzaldehyde中藥標準品  分 子 式: C7H6O2 分 子 量: 122.12134

phospho-EIF4EBP1(Ser100)  磷酸化eIF4E結合蛋白抗體美格魯特N-BUTYLDEOXYNOJIRIMYCIN中藥標準品  分 子 式: C10H21NO4 分 子 量: 219.27804

phospho-EIF4EBP1(Ser111)  磷酸化eIF4E結合蛋白抗體巖大戟內酯Ejolkinolide E化學標準品 分 子 式: C20H28O2 分 子 量: 300.435

EIF5  真核翻譯起始因子5抗體美商陸酸Olean-12-ene-28,29-dioicacid, 3,23-dihydroxy-, 29-methyl ester, (3b,4a,20b)-中藥標準品  分 子 式: C31H48O6 分 子 量: 516.70922


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