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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3459
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-07-09
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3459 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
破梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Clostridium tetani | LZR3459 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母GLUT2 (Glucose Transporter 2)ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
柴油食烷菌AChE (Acetylcholinesterase) ELISA Kit拉丁屬名: Alcanivorax dieselolei
蕈狀芽孢桿菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
茫崖諾卡氏菌ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardia mangyaensis
泡盛曲霉EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori Nakazawa
假芽胞桿菌屬ELOA (Elongin A) ELISA Kit 拉丁屬名: Fictibacillus sp.
廣島鏈霉菌EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis
天目山類芽孢桿菌EG-VEGF (Endocrine Gland Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus tianmuensis
邊緣假單胞菌ALB (Albumin) ELISA Kit用途: 分類、研究，具有處理養(yǎng)殖廢水潛力。
聚生殼菌ERN1 (Endoplasmic Reticulum To Nucleus Signalling 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
漢遜德巴利酵母 ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
粉紅單端孢霉EL (Endothelial lipase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
乳酸乳球菌NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis
原玻璃蠅節(jié)桿菌ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter protophormiae
噬尼古丁節(jié)桿菌EGF (Epidermal Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter nicotinovorans
破梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書GRM2/GLUR2 促代謝型谷氨酸受體2抗體三七皂苷Ft1中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133抗體DL-亮氨酸DL-Leucine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H13NO2 分 子 量: 131.17292
Mucin 4/Muc4 粘蛋白-4抗體大果桉醛BMacrocarpal B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136
BKCA alpha 鈣激活鉀通道蛋白α抗體β，β’-二甲基丙烯酰阿卡寧β, β-dimethylacrylalkannin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22O6 分 子 量: 370.40
HSPB2 熱休克蛋白B2抗體飛燕草色素1-Benzopyrylium,3,5,7-trihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-, chloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H11O7.Cl 分 子 量:
phospho-CD19(Ser227) 磷酸化CD19抗體短葉老鶴草素 A2-Butenoic acid,2-methyl-,(3S,3aR,4S,4aR,7aR,8R,9aR)-2,3,3a,4,4a,5,7a,8,9,9a-decahydro-3,4a,8-trimethyl-2,5-dioxoazuleno[6,5-b]furan-4-ylester, (2Z)-對照藥材 分 子 式: C20H26O5 分 子 量: 346.41744
CD8 CD8抗體月桂烯（香葉烯）7-Methyl-3-methyleneocta-1,6-diene中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.23404
