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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
人膚蠅探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3507
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-05-16
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3507
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

人膚蠅探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Dermatobia hominis

LZR3507

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

熱帶假絲酵母PGA (Pepsinegen A) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis

釀酒酵母PGC (PepsinegenC) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

韓國成對桿菌NT-Pro-ANP (N-Terminal Pro-Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Dyadobacter koreensis

淡紫擬青霉PINP (Procollagen Type I N-Terminal Propeptide) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究

產朊假絲酵母Rt3 (Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  utilis

果生鏈核盤菌TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假單胞菌11-DH-TXB2 (11-Dehydrothromboxane B2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  protegens

葡枝根霉SOD1( Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus  stolonifer

易脆毛霉SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor fragilis

谷氨酸棒桿菌Ⅰ型SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum Ⅰ

意大利青霉SOD4 (Superoxide Dismutase 4, Copper Chaperone) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium italicum

病毒GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Infectious       bronchitis virus

小石地放線菌ANG I (Angiotensin I) ELISA Kit拉丁屬名: Terrabacter  lapilli

聚生殼菌ANG II (Angiotensin II) ELISA Kit拉丁屬名: Botryosphaeria ribis Grossenb.

大腸埃希氏桿菌ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli
人膚蠅探針法熒光定量PCR試劑盒說明書WNT7B  Wnt蛋白家族7B抗體1,7-二羥基-3,4-二甲氧基山酮-7-O-葡萄糖苷中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

Wnt8b  WNT蛋白家族Wnt8b抗體西伯利亞遠志糖A5Sibiricose A5中藥標準品  分 子 式: C32H38O17 分 子 量: 694.63392

VHR/DUSP3  絲氨酸/蘇氨酸特定蛋白磷酸酶抗體阿里辛,馬蹄葉堿,阿立新Oxayohimban-16-carboxylicacid, 16,17-didehydro-10-methoxy-19-methyl-, methyl ester, (19a,20a)-對照藥材 分 子 式: C22H26N2O4 分 子 量: 382.45284

GUK1/Guanylate kinase  鳥苷酸激酶GMK抗體介芬胺中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

IMPAD1  肌醇單磷酸酶IMPA3抗體PBST(10 pH7.4)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

LCMT1  亮氨酸羧基甲基轉移酶1抗體丹參素鈉Sodium danshensu中藥標準品  分 子 式: C9H9NaO5 分 子 量: 220.16

DPPL1  磷脂酸磷酸酶HTPAP抗體蘆薈寧2H-Pyran-2-one, 6-[2-(b-D-glucopyranosyloxy)-4-hydroxy-6-methylphenyl]-4-methoxy-中藥標準品  分 子 式: C19H22O10 分 子 量: 410.37198


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