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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3549
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-07-09
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3549 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鉛黃腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Enterococcus casseliflavus | LZR3549 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
青霉GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit 用途: 分類研究
土曲霉CASP10 (Caspase 10) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus terreus
腸膜明串珠菌PTN (Pleiotrophin) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
芽孢桿菌屬IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
蒙氏假單胞菌GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas monteilii
玉龍小單孢菌pERK ( Phospho Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora yulongensis
大豆慢生根瘤菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit用途: 耐受pH4.5
枯草芽胞桿菌Cx (Connexin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
綠粘帚霉β2-GP (Beta2 Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Gliocladium virens
哈茨木霉αMSH (Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
滑菇CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
毛木耳TTR (Transthyretin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母CALU (Calumenin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
類阿達青霉FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium adametzioides
根瘤菌AST (Aspartate Aminotransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum
鉛黃腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 BCAT2/BCAM 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體RIPA裂解液(中)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Bcl2A1 BCL2相關蛋白A1抗體七葉皂苷IIbb-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,4b,16a,21b,22a)-22-(acetyloxy)-16,23,28-trihydroxy-21-[[(2Z)-2-methyl-1-oxo-2-butenyl]oxy]olean-12-en-3-ylO-b-D-glucopyranosyl-(1®4)-O-[b-D-xylopyranosyl-(1®2)]-中藥標準品 分 子 式: C54H84O23 分 子 量:
Bcl3 B細胞蛋白3抗體維生素B3Nicotinic acid中藥標準品 分 子 式: C6H5NO2 分 子 量: 123.1094
HSD17B6 17-β-羥脫氫酶6抗體異綠原酸BIsochlorogenic acid B中藥標準品 分 子 式: C25H24O12 分 子 量: 516.45
TFF1/BCEI 雌激素誘導蛋白抗體10-羥基攀援山橙堿10-Hydroxyscandine中藥標準品 分 子 式: C21H22N2O4 分 子 量: 366.41038
Galectin 1 半乳糖凝集素1抗體二氫齒孔酸3beta-Hydroxy-24-methylen-lanosta-7,9(11)-dien-21-saeure化學標準品 分 子 式: C31H48O3 分 子 量: 468.711
CENPB 著絲粒蛋白B抗體4-沒食子酰基奎寧酸4-galloylquinic acid化學標準品 分 子 式: C14H16O10 分 子 量: 344.271
