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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3527
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-07-09
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3527
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Edwardsiella tarda

LZR3527

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

尖鐮孢MT (Melatonin) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum Schlechtendal

阪崎克羅諾桿菌PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cronobacter sakazakii

金耳ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Tremella aurantialba Bandoni

解葡聚糖類芽胞桿菌TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus glucanolyticus

美澳型核果褐腐病菌MMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

單增李斯特氏菌GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Listeria  monocytogenes

路德類酵母EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

植物乳桿菌ACA-IgA (Anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

放射形根瘤菌SELP (P-Selectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium radiobacter

香菇FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

橙黃硬皮馬勃PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黑木耳FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit用途: 試驗栽培

多主葡萄殼菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

米曲霉APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

昆明靈芝D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 用途: 食藥用
遲鈍愛德華菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CHCHD2  NS2反式調節蛋白/衰老相關的基因10蛋白抗體妥帕可卡因8-Azabicyclo[3.2.1]octan-3-ol,8-methyl-, 3-benzoate, (3-exo)-化學標準品 分 子 式: C15H19NO2 分 子 量:

CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激酶β抗體瑞枯靈Reticuline中藥標準品  分 子 式: C19H23NO4 分 子 量: 329.39022

CHORDC1  含半胱氨酸和組氨酸豐富域蛋白1抗體毛蘭素Phenol中藥標準品  分 子 式: C18H22O5 分 子 量: 318.36

HIV2 gp36  人類病毒2型抗體(病毒)TEN緩沖液(1×,pH7.2)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-CDK5(Tyr15)  磷酸化周期素依賴性激酶5抗體球花苦苷b-D-Glucopyranoside,(1aS,1bS,2S,*R,6S,6aS)-1a,1b,2,*,6,6a-hexahydro-6-hydroxy-1a-[[[(2E)-1-oxo-3-phenyl-2-propen-1-yl]oxy]methyl]oxireno[4,5]cyclopenta[1,2-c]pyran-2-yl對照藥材 分 子 式: C23H26O11 分 子 量: 478.44594

MRC2/CD280  巨噬細胞甘露糖受體2抗體銀杏酸C15:0Benzoic acid,2-hydroxy-6-pentadecyl-化學標準品 分 子 式: C22H36O3 分 子 量: 348.51944

Tetranectin/CLEC3B/TNA  四連接素TN抗體環磷酸腺苷Adenosine Cyclophosphate化學標準品 分 子 式: C10H12N5O6P 分 子 量: 329.21

 


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