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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

類干酪乳桿菌N-MID-OT (N-MID Osteocalcin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  paracasei

長雙歧桿菌GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium  longum

普通層褶菌SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

香菇CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

橄欖色毛殼F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium olivaceum

抗性微桿菌TIEG1 (TGF Beta Inducible Early Response Gene 1) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium resistens

粉褶環柄菇DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

巨獸芽孢桿菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium

假單胞菌屬HO2 (Heme Oxygenase 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

NocardiaCaN (Calcineurin) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia sp.

枯草芽孢桿菌TMSβ10 (Thymosin Beta 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

多粘類芽孢桿菌BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus polymyxa

膠孢LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit用途: 植物病原物，用于種群的遺傳學研究和炭疽病害的診斷和防治
犬附紅細胞體探針法熒光定量PCR試劑盒規格TMEM49  跨膜蛋白49抗體槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷3-O-beta-D-glucopyranosyl-7-O-alpha-L-rhamnopyranoside 3',4',3,5,7-pentahydroxyflavone化學標準品 分 子 式: C27H30O16 分 子 量: 610.518

TMS1/ASC  凋亡相關斑點樣蛋白ASC抗體野黃芩素Scutellarein中藥標準品  分 子 式: C15H10O6 分 子 量: 286.24

TPD52/Prostate and colon associated protein  和相關蛋白貝母素甲Peimine中藥標準品  分 子 式: C27H45NO3 分 子 量: 431.6511

TPD54/TPD52L2  蛋白D54蛋白抗體異牡荊黃素4H-1-Benzopyran-4-one,6-尾-D-glucopyranosyl-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-化學標準品 分 子 式: C21H20O10 分 子 量: 432.3775

TRIM47  星形細胞瘤高表達蛋白抗體（環指蛋白100）雷公藤春堿3-Furancarboxylic acid,(8R,9R,10R,11S,12R,13R,14R,15S,21S,22S,23R)-10,13,22,23-tetrakis(acetyloxy)-12-[(acetyloxy)methyl]-7,8,9,10,12,13,14,15,17,18,19,20-dodecahydro-18,21-dihydroxy-8,18,21-trimethyl-5,17-dioxo-8,11-epoxy-9,12-ethano-11,15-methano-5H,11H-[1,9]dioxacyclooctadecino[4,3-b]pyridin-14-ylester中藥標準品  分 子 式: C41H47NO20 分 子 量: 873.806580000001

TSP50  /睪丸抗原20抗體Kodak D-19顯影液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65  /睪丸抗原65強Tris鹽緩沖液(pH7.5)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: