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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3601
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-16
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3601
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

Feline Calicivirus(FCV)

LZR3601

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

枯草芽孢桿菌FOXO2 (Forkhead Box Protein O2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

黏著玫瑰變色菌NES1 (Nesfatin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Roseovarius mucocus

球孢白僵菌PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A/Pappalysin-1) ELISA Kit用途: 生物防治

球孢白僵菌CALLA (Common Acute Lymphocytic Leukaemia Antigen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雅致放射毛霉GLβ (Galactosidase  Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomucor  elegans

大腸埃希菌CKLFSF4 (Chemokine Like Factor Superfamily 4) ELISA Kit拉丁屬名: coli

銅綠假單胞菌PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa

Enterobacter cowanii Inoue et al. NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

克魯弗酵母EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces kluyveri

熱帶假絲酵母FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit 用途: 飼料酵母,蛋白質(zhì)含量較高。

蠟狀芽孢桿菌MPIF-1/CCL23 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

短密青霉LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillum brevicompatum

黃曲霉IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  flavus

香氣紅冬孢鎖擲孢酵母NPHN (Nephrin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodosporidiobolus odoratus

谷氨酸棒桿菌Ⅰ型FETUA (Fetuin A) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum
貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 FOXN1  叉頭蛋白N1抗體二氫木蝴蝶素A Dihydrooroxylin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H14O5 分 子 量: 286.27936

Pol II/RNA polymerase II  RNA聚合酶II抗體HEPES-BSA溶液(HACM溶液,含鈣鎂)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Mkl1/MRTF-A  myocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體沒食子兒茶素(2S,3R)-2-(3,4,5-Trihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C15H14O7 分 子 量: 306.26746

Dlx5  同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體噻嗪二酮苷Xanthiside中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C17H23NO8S 分 子 量: 401

FXR2  脆性X相關(guān)蛋白2抗體雌三醇 3-硫酸酯Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol,3-(hydrogen sulfate), (16a,17b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H24O6S 分 子 量: 368.44456

PLC β1/Phospholipase C beta 1  磷酯酶Cβ1抗體鹽酸黃連堿Coptisine chloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C19H14ClNO4 分 子 量: 355.77

EHZF/ZN521  鋅指蛋白521抗體藤黃酸gambogic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C38H44O8 分 子 量: 628.75116

 


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