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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3582 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Equine Herpesvirus(EHV) | LZR3582 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產品:
黑曲霉RUNX2 (Runt-Related Transcription Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
香菇γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
明尼蘇達被毛孢TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit拉丁屬名: Hirsula minnesotensis
武夷小單孢菌EM2 (Endomorphin 2) ELISA Kit用途: 代謝產物具有活性。
北京芽孢桿菌TL1A (Tumor Necrosis Factor Related Ligand 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus beijingensis
米曲霉ETFβ (Electron Transfer Flavoprotein Beta Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
類諾卡氏菌NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides sp.
毒蠅鵝膏菌β-CTx (Beta Crosslaps) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
泡囊短波單胞菌SEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。
大腸埃希氏菌AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
PseudarthrobacterADCY4 (Adenylate Cyclase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudarthrobacter siccitolerans
弗雷德里克斯堡假單胞菌CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
大腸桿菌HB (Hemoglobin) ELISA Kit用途: 獲得來源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學研究及功能檢測
康氏木霉EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蒼白鹽八疊球菌APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Halosarcina pallida
馬病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格MAGEB1 相關抗原B1抗體白鮮堿dictamnine中藥標準品 分 子 式: C12H9NO2 分 子 量: 199.2
MAGEB2 相關抗原B2抗體堿性品紅乙醇溶液(5%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
MAGEB3 相關抗原B3抗體濱蒿內酯6,7-Dimethoxycoumarin中藥標準品 分 子 式: C11H10O4 分 子 量: 206.19
MAGEB4 相關抗原B4抗體牛血清白蛋白溶液(1% BSA)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
MAGEB6 相關抗原B6抗體pH標準緩沖溶液(pH=1.68)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
MAGEC1 相關抗原C1抗體水楊酸鈉Sodium salicylate化學標準品 分 子 式: C7H5NaO3 分 子 量: 160.1
MAGEE1/MAGEC2 相關抗原C2抗體哈巴苷[1S-(1α,4aα,5α,7α,7aα)]-1,4a,5,6,7,7a-hexahydro-4a,5,7-trihydroxy-7-methylcyclopenta[c]pyran-1-yl β-D-glucopyranoside中藥標準品 分 子 式: C15H24O10 分 子 量: 364.34506