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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
三代蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3656
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-05-16
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3656
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

三代蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Gyrodactylus salaris

LZR3656

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

鏈霉菌Monkey cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit用途: 具有一定殺蟲活性。

根瘤桿菌屬Monkey NF (Neurofilament) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobacter? dauci

米曲霉Monkey VEGFR-2/KDR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

薩氏艾美耳球蟲Monkey AGA (Anti-Gliadin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: saitamae

平菇Monkey IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

不解糖鞘氨單胞菌Monkey STAT6B (Signal Transducer and Activator of Transcription 6B) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas asaccharolytica

擴展青霉Monkey C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

斐濟球腔菌Monkey EFNA3 (Ephrin A3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鼠李糖乳桿菌Monkey NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus

紅色紅曲Monkey SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus  ruber

阿穆爾斯克灣鹽地桿菌Monkey MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium  amurskyense

柴油食烷菌Monkey CDK8 (Cyclin Dependent Kinase 8) ELISA Kit拉丁屬名: Alcanivorax dieselolei

金孢霉屬Monkey EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Geomyces  sp.

淺紫灰直絲鏈霉菌Monkey TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lavendularectus

枯草芽孢桿菌枯草亞種Monkey TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. spizizenii
三代蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商CENPP  著絲粒蛋白P抗體表莪術呋喃烯酮Epicurzerenon化學標準品 分 子 式: C15H18O2 分 子 量: 230.302

PCNT/Pericentrin  中心粒周蛋白抗體過氧麥角甾醇Ergosta-6,22-dien-3-ol,5,8-epidioxy-, (3b,*,8a,22E)-對照藥材 分 子 式: C28H44O3 分 子 量:

Importin4/RanBP4  核蛋白4抗體(Ran結合蛋白4)柚皮苷二氫查爾酮Naringin dihydrochalcone中藥標準品  分 子 式: C27H34O14 分 子 量: 582.56

MIS12  染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體蓽茇酰胺piperlongumine中藥標準品  分 子 式: C17H19NO5 分 子 量: 317.33646

CDCA1/Nuf2  細胞分裂周期相關蛋白1抗體七葉皂苷Bβ-d-Glucopyranosiduronic acid, [3β,16α,21β(Z),22α]-22-(acetyloxy)-16,24,28-trihydroxy-21-[(2-methyl-1-oxo-2-butenyl)oxy]olean-12-en-3-yl O-β-d-glucopyranosyl-(1→2)-O-[β-d-glucopyranosyl-(1→4)]-中藥標準品  分 子 式: C55H86O24 分 子 量: 1133.27

Importin 9/RanBP9  核蛋白9抗體(Ran結合蛋白M)鹽膚木內酯 ARhuscholide A對照藥材 分 子 式: C31H42O3 分 子 量: 462.66338

SPC25  紡錘體極點構成蛋白25抗體葫蘆素IIACucurbitacin A化學標準品 分 子 式: C32H50O8 分 子 量: 562.7346


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