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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3685
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-08-22
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3685 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
病毒E型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Hepatitis B Virus(HBV) | LZR3685 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
香菇Monkey PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes
草酸青霉Monkey Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum
假單胞菌屬Monkey HSP-90 (Heat Shock Protein 90) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas arsenicoxydans
果生鏈核盤菌Monkey ECFR (Eosinophil Chemotactic Factor Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
三棱孢小囊菌Monkey fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Microascus trigonosporus
米氏假單胞菌Monkey Bcl-10 (B-cell Leukemia/Lymphoma 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas migulae
解淀粉周培瑾氏菌Monkey RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit拉丁屬名: Zhouia amylolytica
皺曲毛殼Monkey ADCY4 (Adenylate Cyclase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium crispatum
鼠乳桿菌Monkey FcγR II/CD32 (Receptor II for the Fc Fragment of IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus murinus
釀酒酵母Monkey PADI4 (Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Monkey AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
福氏志賀氏菌Monkey CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟狀芽孢桿菌Monkey CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
細(xì)極鏈格孢Monkey LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
美澳型核果褐腐病菌Monkey PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructicola
病毒E型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 CDC2L5 細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶5抗體氯化錦葵色素-3-O-葡萄糖苷1-Benzopyrylium, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-,chloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H25O12+.Cl- 分 子 量: 528.8904
PICK1 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1抗體梓醇Catalpol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22O10 分 子 量: 362.33
INCA1 INCA1蛋白抗體鼠尾草酚酮9H-Cyclohepta[a]naphthalen-9-one,1,2,3,4-tetrahydro-10-hydroxy-4,4,8-trimethyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H20O2 分 子 量:
MS4A3/CD20L CD20樣蛋白抗體（造血干細(xì)胞4跨膜蛋白3）甜菊雙糖苷STEVIOLBIOSIDE STANDARD中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H50O13 分 子 量: 642.7316
Amylin 相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體Earle's平衡鹽溶液(1×EBSS,無(wú)鈣鎂糖酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
SPDYA 細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體莫諾苯宗4-Benzyloxyphenol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H12O2 分 子 量: 200.23318
phospho-FRS2(Tyr436) 磷酸化成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物2抗體1-羥基-2-甲基蒽醌9,10-Anthracenedione,1-hydroxy-2-methyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H10O3 分 子 量: 238.2381
