91亚洲欧美-91亚洲欧美综合高清在线-91亚洲区国产区精品区-91亚洲视频在线-91亚洲视频在线观看-91亚洲综合

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

髓囊畢赤酵母Monkey CAMK2α (Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Kuraishia capsulata

聚貪噬菌Monkey DLK-1 (Delta Like 1 Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Variovorax  boronicumulans

芽孢乳酸菌干粉Monkey MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: 芽孢乳酸菌干粉

釀酒酵母Monkey MR (Mannose Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

豌豆根瘤菌Monkey α2-M (Alpha-2 Macroglobulin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

微白黃鏈霉菌Monkey TUBα3C (Tubulin Alpha 3c )ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus

河北鏈霉菌Monkey GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces hebeiensis

費氏中華根瘤菌Monkey INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit用途: 能與我國栽培大豆共生固氮

大腸埃希菌Monkey MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

釀酒酵母Monkey CaSR (Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

芽枝狀枝孢Monkey CD97 (Cluster of Differentiation 97) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

葡糖酸醋桿菌屬Monkey IAPP (Islet Amyloid Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Gluconacetobacter  sp.

雜色曲霉Monkey ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor

球孢白僵菌Monkey IL-11 (Interleukin 11) ELISA Kit用途: 生物防治

栗疫菌Monkey OSMR (Oncostatin M Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
人病毒33探針法熒光定量PCR試劑盒說明書RB1CC1  RB1的誘導(dǎo)卷曲蛋白RB1CC1抗體磺胺對甲氧嘧啶4-Amino-N-(5-methoxypyrimidin-2-yl)benzenesulfonamide化學(xué)標準品 分 子 式: C11H12N4O3S 分 子 量: 280.30298

COX5A  細胞色素c氧化酶5A抗體蟲草素Cordycepin中藥標準品  分 子 式: C10H13N5O3 分 子 量: 251.24

CHCHD6  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體羅漢果苷VIMogroside VI中藥標準品  分 子 式: C66H112O34 分 子 量: 1449.57508

GTF2B  通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體巨大戟醇-3-O-當歸酸酯Ingenol-3-angelate中藥標準品  分 子 式: C25H34O6 分 子 量: 430.53386

CBX1/HP1 β  異染色體同源蛋白1抗體大麻螺醇Spiro[cyclohexane-1,1'-[1H]indene]-4,7'-diol,2',3'-dihydro-5'-methoxy-, cis-對照藥材 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.3175

KMT3B/NSD1/ARA267  組蛋白甲基化KMT3B抗體（雄激素受體激活蛋白）肉桂酸t(yī)rans-Cinnamic acid中藥標準品  分 子 式: C9H8O2 分 子 量: 148.15862

NFIC  核因子1C型抗體去甲布拉易林Norbraylin對照藥材 分 子 式: C14H12O4 分 子 量: 244.24268