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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

毛柄金錢菌(金針菇)NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit用途: 用于科研教學(xué)。

酒酒球菌GP39 (Glycoprotein 39, Cartilage) ELISA Kit拉丁屬名: Oenococcus  oeni

毛霉屬BCAR1 (Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor  sp.

釀酒酵母E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

中慢生華癸根瘤菌TAF1 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 1) ELISA Kit 用途: 與紫云英共生結(jié)瘤固氮

四脊曲霉IL-15 (Interleukin 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus quadrilineatus

枯草芽孢桿菌IL-23 p40(Interleukin 23) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

肉色栓菌PROC (Protein C) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

西洼湖戈登氏菌REG1β (Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Gordonia sihwensis

芽孢桿菌CLCF1 (Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus aryabhattai

EscherichiaMPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli/DH5α

青霉屬MYOG (Myogenin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

穿孔素假單胞菌CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas pertucinogena

黑曲霉PAC3 (Platelet Associated Complement 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger niger var. niger Tiegh.

枯草芽孢桿菌NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ANKRD37  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ANKRD40  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體阿福豆苷KAEMPFEROL 3-O-GLUCORHAMNOSIDE對照藥材 分 子 式: C21H20O10 分 子 量: 432.38

Igj  免疫球蛋白j鏈抗體二羥丙茶堿D甲醚2(3H)-Furanone,3-[[(1S,4aS,8aS)-decahydro-5,5,8a-trimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl]methylene]dihydro-5-methoxy-,(3E)-對照藥材 分 子 式: C21H32O3 分 子 量:

APAF1(CT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）酸棗仁皂苷AJujuboside A中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C58H94O26 分 子 量: 1207.35

ANKRD42  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體氫化原*堿Hydroprotopine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H20NO5+ 分 子 量: 354.3765

CARKD  碳水化合物激酶結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體對甲氧基肉桂酸乙酯Ethyl 3-(4-methoxyphenyl)acrylate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C12H14O3 分 子 量: 206.23776

CASD1/C7orf12  第七號染色體開放閱讀框12抗體脂肪組織固定液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: