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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3851
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-07-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3851
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Mycobacterium ulcerans

LZR3851

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

植物乳桿菌POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

光孢黃叢枝珊瑚菌Anti-AChR (Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit用途: 可食用

蘋果鏈格孢PFKP (Phosphofructokinase, Platelet) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Pseudomonas coleopterorumPDGF-AA (Platelet Derived Growth Factor-AA) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas coleopterorum

蘇云金芽胞桿菌印第安那亞種BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

臺灣根霉NFκB (Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus  formosensis

葡萄座腔菌Collagenase I ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

干草鞘氨單胞菌COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas  faeni

Marinobacter excellensGCLM (Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit 拉丁屬名: Marinobacter excellens

陰溝腸桿菌溶解亞種Arg (Arginase) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter cloacae subsp. dissolvens

淡紫擬青霉GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

葉片微桿菌CCR1 (CC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium foliorum

黑靈芝NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母PPAR-γ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

穿孔艾美耳球蟲GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit拉丁屬名: perforans
分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FIGNL1  FIGNL1蛋白抗體紫莖女貞苷CLigupurpuroside C 中藥標準品  分 子 式: C35H46O17 分 子 量:  738.736

APC70/CRSP70  轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體山奈酚葡萄糖醛酸苷b-D-Glucopyranosiduronic acid,5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-4H-1-benzopyran-3-yl化學(xué)標準品 分 子 式: C21H18O12 分 子 量:

PAP-α/β/γ  多聚合酶α/β/γ抗體法莫替丁famotidine對照藥材 分 子 式: C8H15N7O2S3 分 子 量: 337.45

Geminin  DNA復(fù)制抑制因子抗體異硫氰酸胍溶液(5mol/L)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

FAR1  脂肪酰基輔酶A還原酶1抗體焦袂康酸3-Hydroxy-4H-pyran-4-one中藥標準品  分 子 式: C5H4O3 分 子 量: 112.08346

BBS5  巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體大豆腦苷 IIHexadecanamide,N-[(1S,2R,3E,7Z)-1-[(b-D-glucopyranosyloxy)methyl]-2-hydroxy-3,7-heptadecadien-1-yl]-2-hydroxy-,(2R)-對照藥材 分 子 式: C40H75NO9 分 子 量: 714.0248

FOXO1A  叉頭蛋白O1抗體硫酸天仙子胺水合物HYOSCYAMINE SULFATE   化學(xué)標準品 : 2[C17H23NO3].H2O4S 分 子 量: 676.81732

 


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