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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3853
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-08-22
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3853
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

Mycoplasma agalactiae

LZR3853

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

室內外電子溫濕度計TR (Testosterone Receptor) ELISA Kit規格: 微型便攜式

堅強芽孢桿菌DMD (Dystrophin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黃孢原毛平革菌NTXI (Cross Linked N-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Phanerodontia chrysosporium

綠色木霉BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

檸檬黃色紅色桿菌MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Erythrobacter citreus

橙黃紅酵母CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula aurantiaca

季也蒙假絲酵母GC (Glycocalicin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  guilliermondii

釀酒酵母GzmB (Granzyme B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

黑木耳NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia  auricula

黑腐皮殼菌ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蠟狀芽孢桿菌ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

解脂耶氏酵母PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Yarrowia  lipolytica

球托霉菌屬w5菌株CFB (Complement Factor B) ELISA Kit 拉丁屬名: Gongronella  sp.

孟氏假單胞菌PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

根瘤菌FcαR/CD89 (Receptor I for the Fc Fragment of IgA) ELISA Kit用途: 固氮
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 BMP10  骨形態發生蛋白10抗體TerameprocolTerameprocol化學標準品 分 子 式: C22H30O4 分 子 量: 358.47

TSPAN9/NET-5  四分子交聯體9/四旋蛋白抗體(+/-)-兒茶精2-(3,4-Dihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol化學標準品 分 子 式: C15H14O6 分 子 量: 290.26806

TET2  甲基雙加氧酶TET2抗體去氫苦木堿Kumujian G對照藥材 分 子 式: C15H14N2O2 分 子 量: 254.28386

5 MethylCytosine  5甲基胞嘧啶抗體無梗五加苷BEleutheroside E1中藥標準品  分 子 式: C28H36O13 分 子 量: 580.57764

FOG1  GATA結合蛋白1伴侶蛋白抗體L-谷氨酰胺L-Glutamine氨基酸類 分 子 式: C5H10N2O3 分 子 量: 146.1445

RGS4  相關蛋白9抗體Triton X-100細胞裂解液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GPBB/PYGB  腦糖原磷酸化酶抗體紫羅蘭酮4-(2,6,6-Trimethylcyclohex-1-en-1-yl)but-3-en-2-one中藥標準品  分 子 式: C13H20O 分 子 量: 192.2973


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