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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3935
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-07-07
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3935
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Parechovirus(PeV)

LZR3935

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

水管致黑棲熱菌cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Thermus scotoductus

爪哇青霉C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium javanicum

紫色紅曲TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus  purpureus

大腸埃希氏菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

釀酒酵母HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae

芽孢八疊球菌屬BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit  拉丁屬名: Sporosarcina  sp.

蠟狀芽孢桿菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

美澳型核果褐腐病菌CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假臍菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌CLEC4E (C-Type Lectin Domain Family 4 Member E) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

肉色迷孔菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Daedalea dickinsii

普利茅斯沙雷氏菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

魯考弗美奇酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Metschnikowia  reukaufii

檸檬兩面神菌NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit拉丁屬名: Janibacter  melonis

深藍紫色桿菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Janthinobacterium  lividum
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書AGT 英文名稱: 緊張素原 0.1ml

Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、CIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加壓素/精氨酸加壓素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白16IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻譯延長因子2 規格 0.2ml

Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 魚類超敏C反應蛋白 96T

MRAP2 英文名稱: 黑素皮質素2受體輔助蛋白2 0.2ml

C9orf86 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框86 0.2ml

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細胞關鍵蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人素D合成酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細胞關鍵蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IDH1/Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶1 規格 0.2ml

LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T

PCDH11Y 英文名稱: 原鈣粘附蛋白11Y 0.2ml

Anti-c-Abl 非受體酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies規格: 0.1ml

phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1+B2 0.1ml

酪氨酸激酶C Anti-Trk C 0.2ml

Anti-TREM1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發受體1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2 規格 0.1ml

BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特價供應

CHAD 英文名稱: 富含亮酸軟骨蛋白 0.1ml

Anti-Hck 造血細胞激酶Multi-class antibodies規格: 0.2ml

HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素輔因子ⅡMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MARVELD1 候選抑制基因MARVELD1 規格 0.2ml

MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T

RNF 英文名稱: E3泛素蛋白連接酶A 0.2ml

 


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