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PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品：

粉粒紅濕傘MAG (Myelin Associated Glycoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

*蛹蟲草（北冬蟲夏草、北蟲草）TRY (Trypsin) ELISA Kit 拉丁屬名: Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link

頂孢頭孢霉Ly6a (Lymphocyte Antigen 6 Complex Locus A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

皺紋單胞菌CPR (Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit 拉丁屬名: Rugamonas rubra

北極土地桿菌TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter  arcticus

枯草芽孢桿菌TPO (Thyroid Peroxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

隔離土地桿菌CT (Calcitonin) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter insulae

炭疽芽胞桿菌TECK/CCL25 (Thymus Expressed Chemokine) ELISA Kit 拉丁屬名: anthracis

賴氨酸芽孢桿菌 拉丁屬名：Lysinibacillus? odysseyi 規格：凍干物 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 模式菌株:模式菌株 主要用途:分類；研究；教學 特征特性:細胞呈直桿狀，常以成對或鏈狀排列，具圓端或方端。細胞染色大多數在幼齡培養時呈現革蘭氏陽性，以周生鞭毛運動。每個細胞產一個芽孢，能適應許多不良環境。好氧或兼性厭氧。化能異養菌，具有發酵或呼吸代謝類型。通常接觸酶陽性。 

細極鏈格孢 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教學 具體用途： 特征特性：菌落暗青色，分生孢子梗短鏈生或單生，卵形，倒棒狀，淡青褐色至深青褐色，具橫膈膜3-6個，縱、斜隔膜1-4個，分隔處略隘，25.0-39.5×9.0-13.0微米，喙及假喙柱狀，淡褐色，5.0-27.5×2.5-3.5微米。

賈巴爾普爾毛殼 拉丁屬名：Chaetomium jabalpurense 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

病毒 拉丁屬名：Avian influenza virus 規格：凍干物 用途：研究 教學 檢驗 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

卷枝毛霉灰藍變型 拉丁屬名：Mucor circinelloides f. griseocyanus 規格：凍干物 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

黏液桿菌 拉丁屬名：Mucilaginibacter rigui 規格：凍干物 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:分類；研究；教學 特征特性:革蘭氏陰性菌，嚴格好氧。無孢子形成，無運動性，菌落形態圓形，光滑。生長溫度為4到37度，細胞大小0.4-0.8X0.8-2.5μm。 

Eucasphaeriacapensis Crous 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 拉丁屬名：Eucasphaeria 種名加詞：Eucasphaeria 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教學 具體用途： 特征特性：子囊孢子無色，guttulatae,梭形到橢圓形，略彎曲， 1隔, (17–)19–25(–28) × 3–)3.5(–4) µm。分生孢子無色，寄主植物上(16–)20–22(–27) × (2–)2.5(–3)，培養下(22–) 25–30(–40) × 3(–4) µm。  

藤黃色短小桿菌 拉丁屬名：Curtobacterium luteum 用途：模式菌株 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

黃孢平革菌 用途：紅麻制漿 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用 屬名：Phanerochete 種名加詞：chrysosporium 模式菌株：非模式菌株 主要用途：a:2:{i:0;s:4:研究;i:1;s:4: ;} 特征特性：寄生在沒有生命的木材上，擔子果革質，鋪展狀，菌蓋蛤殼狀，有一短柄，子實層孔狀，生于菌褶上。菌落白色，菌肉白色；菌絲白色，蔓延于四周，低伏，基質膜狀。 具體用途：紅麻制漿

暗黃紫色小單孢菌 拉丁屬名：Micromonospora fulvoviolacea 注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

細極鏈格孢PLB (Phospholipase B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

巴奈特酵母MTHFR (Methylenetetrahydrofolate Reductase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces barnettii

煙管菌TTN (Titin) ELISA Kit拉丁屬名: Bjerkandera adusta

布氏白僵菌（卵孢白僵菌）MCF (Macrophage Chemotatic Factor) ELISA Kit用途: 鞘翅目昆蟲生物防治

枯草芽胞桿菌FCN1 (Ficolin 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母GKN1 (Gastrokine 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

大腸桿菌C/EBPδ (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Delta) ELISA Kit用途: 教學科研，用于構建orf8缺失突變株。
鄰單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格人e(HBeAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-hepatitis B virus e antibody，HBeAb ELISA Kit特價供應

人表面(HBsAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-hepatitis B virus surface antibody，HBsAb ELISA Kit特價促銷

人核心IgM(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-hepatitis B virus core IgM，HBc-IgM antibody ELISA Kit進口/原裝

PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯氨酸羥化酶(多肽)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-B7-DC/CD273 程序性死亡配體2Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2 規格 0.1ml

Mast Cell Tryptase 濃縮液 0.1ml 進口分裝

CACYBP 英文名稱： 鈣周期素結合蛋白 0.2ml

Anti-PPARGC1A/PGC-1 Alpha 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1αMulti-class antibodies規格： 0.2ml

LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit 人軍團菌IgAMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-Klf4 腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LASS4 長壽相關基因lASS4 規格 0.2ml

AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰膽堿受體 96T

PTPIP51 英文名稱： 蛋白酪酸磷酸酶相互作用蛋白51 0.2ml

Desmoglein 3 英文名稱： 橋粒芯蛋白3 0.1ml

β淀粉樣肽β-Amyloid 1-40/Aβ1-40 C端 Anti-β-Amyloid 1-40/Aβ1-40 0.1ml

Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標記CASPASE3凋亡抑制劑IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Ezrin (Tyr353) 磷酸化埃茲蛋白 規格 0.1ml

Cyclin D2 周期素D2抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

人軟骨寡聚基質蛋白(COMP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit特價促銷

人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit進口/原裝

CHMP1A 英文名稱： 染色質修飾蛋白1A 0.2ml

Anti-PAX1 配對盒基因1Multi-class antibodies規格： 0.2ml

ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β轉換酶Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-NDRG1/Cap43 分化相關基因NDRG1Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-4I1 白細胞介素4誘導蛋白1 規格 0.2ml

MMP-13 ELISA kit 大鼠基質金屬蛋白酶13 96T

PRMT6 英文名稱： 組蛋白精酸甲基轉移酶6 0.1ml