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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4078 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
粘質沙雷菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Serratia marcescens | LZR4078 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
地芽孢桿菌屬UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus sp.
棉毛狀嗜熱霉EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus
栗色針孔菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
毛柄金錢菌(金針菇)ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit用途: 食用、藥用
不動桿菌SIAE (Sialic Acid Acetylesterase) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter radioresistens
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白磷蘑菇MTF (Microtransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bernardii Quél.
枯草芽孢桿菌CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Microbacterium flavumSCT (Secretin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
哈茨木霉PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產紫青霉TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium purpurogenum
腸膜明串珠菌IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
歧異假絲酵母PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida diversa
焦土鏈霉菌PLA2G10 (Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces showdoensis
粘質沙雷菌探針法熒光定量PCR試劑盒規格小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Progesterone,PROG ELISA Kit進口/原裝
小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit特價促銷
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse apoprotein,apo-A1 ELISA Kit進口/原裝
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit特價促銷
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit進口/原裝
IL-8 白介素8(白細胞介素-8)(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-CD22/BLCAM B淋巴細胞粘附分子CD22Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Cathepsin Z 英文名稱: 組織蛋白酶z 0.1ml
Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導蛋白16Multi-class antibodies規格: 0.1ml
NTX(Human cross linked N-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原N末端肽Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-HSP90 Alpha 熱休克蛋白90αMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARCH8 膜相關環指蛋白8 規格 0.2ml
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1 96T
Phospho-Ret (Tyr905) 英文名稱: 磷酸化指狀蛋白RET 0.1ml
ADM R 英文名稱: 腎上腺髓質素受體 0.1ml
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標記CD26IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PF3(Mouse platelet factor 3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標記半胱氨酸蛋白酶8相關蛋白2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELMO1 吞噬細胞運動蛋白1 規格 0.2ml
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T
MMP-26 英文名稱: 基質金屬蛋白酶-26 0.2ml
CLK3 英文名稱: 細胞分裂周期樣激酶3 0.2ml
Anti-oxytocin receptor 催產素受體(縮宮素受體)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-NRF-1 核呼吸因子-1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGC 非洲爪蟾IGC 規格 1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1 96T
PARL 英文名稱: 骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL 0.2ml