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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
葡萄狀穗霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4091
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-07-04
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4091
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

葡萄狀穗霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Stachybotrys spp.

LZR4091

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

梭形凸臍蠕孢PKIα (Protein Kinase Inhibitor Alpha) ELISA Kit 用途: 研究

炭黑曲霉C3 (Complement Component 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  carbonarius

粉肉擬層孔菌Ep-CAM/CD326 (Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大洋枝芽孢桿菌ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus oceani

枯草芽孢桿菌F10 (Coagulation Factor X) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

尖孢鐮孢TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum

茶輪斑盤多毛孢菌Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit用途: 植物病原物,為該病防治提供依據

微球菌ANGPTL1 (Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.

柞蠶鏈球菌DDC (Dopamine Decarboxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus pernyi

釀酒酵母MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

泡囊短波單胞菌CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。

Enterobacter cloacae subsp. dissolvensC4 (Complement Component 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

LMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

哈茨木霉GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma  harzianum

灰黃青霉fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium griseofulvum
葡萄狀穗霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書DUOXA1 英文名稱: 雙氧化酶成熟因子 0.2ml

Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

E2F6 英文名稱: 轉錄因子E2F6 0.1ml

上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2 anti-Tie2 0.2ml

Anti-Tn-C/FITC 熒光素標記腱糖蛋白-CIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-KLF5(Ser311) 磷酸化腸道內富含的Kruppel樣因子5 規格 0.1ml

PACAP/VIP receptor 腺苷酸環化酶激活肽/活性腸肽受體(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

CCAP 英文名稱: 心動加速蛋白多肽 0.2ml

Anti-Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

BB-Ab(Human anti-B burgdorleri antibody) ELISA Kit 人抗BBMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-IL-27R/TCCR 白細胞介素27受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LTBP4 轉化生長因子β結合蛋白4 規格 0.2ml

BSP(Human bone sialoprotein) ELISA Kit 人骨涎蛋白 96T

RAB5 英文名稱: ras癌基因家族Rab5蛋白 0.1ml

人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒英文名稱:human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA Kit特價促銷

SIP1 peptide 運動神經元存活蛋白結合蛋白1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Bim 細胞死亡調解子Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PGGT1A/FNTA 蛋白香葉烯基轉移酶1α 規格 0.2ml

Flt-1/VEGFR1 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Urocortin 3 英文名稱: 尿皮質素UCN3 0.1ml

CCL24 英文名稱: 嗜酸粒細胞趨化蛋白24 0.2ml

CLSTN2 英文名稱: 相關類鈣粘蛋白CS2 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgGMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-KCNA7 鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Layilin 透明質酸受體 規格 0.1ml

SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人生長抑素 96T

PSMD6 英文名稱: 蛋白酶調解因子6 0.2ml


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