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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
都柏林沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4043
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-07-04
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4043
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

都柏林沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Salmonella dublin

LZR4043

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

白布勒擔孢酵母ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bulleromyces albus

寡養單胞菌BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

印度洋新鞘氨菌FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Novosphingobium indicum

粉褶側耳、粉紅側耳Anti-MPO (Anti-Myeloperoxidase Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus rhodophyllus  Bres.

果生鏈核盤菌ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

殼菌TPO (Thyroid Peroxidase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

琉球曲霉FcγR II/CD32 (Receptor II for the Fc Fragment of IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus luchuensis

酮叢毛單胞菌TAP (Trypsinogen Activation Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Comamonas testosteroni

展示接霉sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Zygorhynchus exponens

解脂亞羅酵母SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Yarrowia  lipolytica

柿生假絲酵母EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida diospyri

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種F7 (Coagulation Factor Ⅶ) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens

木霉MX1 (Myxovirus Resistance 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

美澳型核果褐腐病菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

酵母屬ES-Ab (Anti-Endostatin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  sp.
都柏林沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書beta Glucan Receptor 英文名稱: β葡聚糖受體 0.1ml

Anti-Slug 鋅指轉錄因子SlugMulti-class antibodies規格: 0.2ml

ATR ELISA Kit 大鼠抗凝血酶受體Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-WNT9A 信號通路Wnt9aMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運載蛋白1 規格 0.1ml

G-CSF(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒細胞集落刺激因子 96T

NAT8B 英文名稱: N-乙酰轉移酶8B 0.2ml

Casein kinase 1 gamma 2 英文名稱: 酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1 0.2ml

Anti-PACAP R1/VIP receptor-I 腺苷酸環化酶激活肽受體-IMulti-class antibodies規格: 0.2ml

NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit 人去甲腎上腺素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Lpin1 protein Lpin1 Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KLH 血藍蛋白 規格 0.1ml

LH ELISA Kit 大鼠促黃體激素 96T

PGRPS 英文名稱: 肽聚糖識別蛋白1 0.1ml

phospho-BCAR1(Tyr165) 英文名稱: 磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1 0.1ml

Anti-S100A13 S100A13Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人抑制因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-SCN1A SCN1AMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GRAMD2 GRAM結構域蛋白2 規格 0.2ml

Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯 96T

Osteocalcin 英文名稱: 骨鈣蛋白/骨鈣素 0.1ml

CKMT 英文名稱: 酸性線粒體肌酸激酶 0.1ml

Anti-LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Alpha-bungarotoxin, Alpha-BGT ELISA Kit α-銀環蛇毒素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr351)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CXorf56 X染色體開放閱讀框56 規格 0.2ml

PRRSV M protein 豬藍耳病病毒M蛋白 0.5mg

phospho-Kv4.2(Thr607) 英文名稱: 磷酸化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2 0.1ml


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