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- 品牌：聯(lián)祖
- 產地：進口、國產
- 貨號：LZR4161
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-05-09
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4161 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Theileria orientalis | LZR4161 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。
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Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDBP2/PTTG1IP 瘤病毒調控因子1(鋅指蛋白395) 規(guī)格 0.2ml
AQP-2 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2 96T
P51A 英文名稱： 抑制基因p63α 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗狗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標記磷酸化信號轉導和轉錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NADPH ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AVPR2/FITC 熒光素標記精氨酸加壓素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EVC2 膜蛋白EVC2 規(guī)格 0.1ml
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Connexin-45 英文名稱： 間隙連接蛋白45 0.1ml
Anti-Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
RV(Human RotavirusIgM) ELISA Kit 人輪狀病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-mu Opioid receptor μ-型受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LANCL2 G蛋白偶聯(lián)受體69B 規(guī)格 0.2ml
ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受體 96T
P2RX7 英文名稱： 嘌呤受體P2X7 0.2ml
