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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

褐黃金錢菌LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

巴氏醋桿菌羅旺亞種LTF/LF (Lactoferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter  pasteurianus subsp. lovaniensis

內(涂)鏈霉菌LDL (Low Density Lipoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces endus

紫紅曲霉LEP (Leptin) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus purpureus

蠟狀芽孢桿菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  cereus

藤黃色土生單胞菌MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Terrimonas  lutea

長根小奧德蘑RETN (Resistin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

葡萄座腔菌MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

福氏志賀氏菌MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

熒光假單胞菌生物型FMMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  fluorescens biotype F

魯氏酵母MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  rouxii

諾爾氏菌屬MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Knoellia    locipacati

釀酒酵母ANG (Angiogenin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
RT-病毒野生株探針法熒光定量PCR試劑盒 小鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit進口/原裝

小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit 進口/原裝

小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit進口/原裝

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit特價供應

PKB (human) 人蛋白激酶BMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-CXCR1/IL-8RA 細胞表面趨化因子受體1Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NGX6 細胞相關基因6 規格 0.1ml

CD177 英文名稱： 嗜中性粒細胞抗原CD177 0.2ml

Anti-BrdU 溴脫氧尿苷Multi-class antibodies規格： 0.1ml

B7-H4 B7-H4(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-DPP-I 組織蛋白酶CMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHGA4 原鈣粘蛋白γA4 規格 0.2ml

TNF Kit Human 人 TNF-alpha / TNFA / TNFSF2 ELISA配對 ELISA

phospho-Tau protein(Thr529) 英文名稱： 磷酸化微管相關蛋白 0.1ml

Ubiquitin D 英文名稱： 泛素D 0.2ml

DUSP13 英文名稱： 雙特異性磷酸酶13 0.2ml

Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6Multi-class antibodies規格： 0.2ml

phospho-eIF4EBP1+2+3 (Thr45) 英文名稱： 磷酸化4E結合蛋白1,2,3 0.1ml

磷酸化蛋白激酶B anti-P-AKT1/PKB1/2/3 0.1ml

Anti-SYK/FITC 熒光素標記非受體型酪氨酸蛋白激酶IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA損傷關鍵蛋白Mre11 規格 0.1ml

CRIPTO 英文名稱： 衍化生長因子單克隆(C端) 0.1ml

Anti-PCNA 增殖細胞核抗原Multi-class antibodies規格： 0.1ml

VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit 人維生素D2Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-PLK1/STPK13 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Plk1Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HERG/KCNH2/ERG 特異性鉀離子通道蛋白 規格 0.1ml

Col IV (Human Collagen Type IV ) ELISA KIT 人Ⅳ型膠原 96T

PQBP1 英文名稱： 多谷酰胺結合蛋白1 0.2ml