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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
田鼠痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4243
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-05-09
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4243
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

田鼠痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Volepox Virus

LZR4243

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

狹窄刺革菌拉丁屬名: Hymenochaete attenuata

耐鹽枝孢拉丁屬名: Cladosporium halotolerans

巨枝膝梗孢拉丁屬名: Gonytrichum macrocladum

蠟葉曲霉拉丁屬名: Aspergillus herbariorum

異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus

根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

青變色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces  glaucovarians

多色節桿菌拉丁屬名: Arthrobacter polychromogenes

季也蒙邁耶氏酵母拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

*芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus infantis

新疆鹽地桿菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense

煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus Fresenius

硬桿菌拉丁屬名: Arthrobacter  scleromae

季也蒙假絲酵母拉丁屬名: Candida guilliermondii
田鼠痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2 Anti-ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2 0.1ml

Escherichka coli K99 英文名稱: 豬源產腸毒素性大腸桿菌K99 0.2ml

P選擇素 Anti-P-selectin 0.1ml

Anti-Synapsin II /FITC 熒光素標記神經突觸素2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因) 規格 0.1ml

HIV-1(gp41) 病毒(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

大鼠Smad7 ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA Kit特價供應

CD27 英文名稱: CD27 0.2ml

Anti-DR3/APO3 死亡受體3Multi-class antibodies規格: 0.2ml

TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化調節趨化因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-GADD34 生長抑制DNA損傷基因34Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/APC APC標記的小鼠抗人IgG 規格 0.1ml

human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 96T

SPRN 英文名稱: 新朊蛋白 0.2ml

Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 人視黃酸誘導基因/RIG-1樣受體 96T

TRPV2 英文名稱: 辣椒素受體樣蛋白1 0.1ml

CHMP2A 英文名稱: 腺癌標志物CHMP2A 0.1ml

Anti-CXCR1/IL-8RA 細胞表面趨化因子受體1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Interleukin 23,IL-23 ELISA Kit進口/分裝

小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Interleukin 27,IL-27 ELISA Kit特價供應

小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit進口/分裝

CRTAM 英文名稱: CRTAM 0.2ml

Anti-DPP-I 組織蛋白酶CMulti-class antibodies規格: 0.2ml

AQP4(aquaporin Protein-4) 水通道蛋白-4(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

anti-Cathepsin B 組織蛋白酶BMulti-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGA5 原鈣粘蛋白γA5 規格 0.2ml

NTRK2 Kit Human 人 Trk-B / NTRK2 ELISA配對 ELISA

phospho-Tau protein(Thr522) 英文名稱: 磷酸化微管相關蛋白 0.1ml


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