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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

普利茅斯沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia plymuthica

志賀氏菌拉丁屬名: Shigella dysenteriae

赭鱗蘑菇用途: 食用菌、藥用

俄勒岡靈芝拉丁屬名: Ganoderma oregonense

苜蓿中華根瘤菌拉丁屬名: Ensifer meliloti

扣囊復膜孢酵母拉丁屬名: Saccharomycopsis  fibuligera

小馬勃注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

灰黃淺黃酵母拉丁屬名: Chrysozyma griseoflava

貝氏葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

擬鷲峰假絲酵母拉丁屬名: Candida pseudojiufengensiss

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

紅色蠟蘑注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia  marcescens

食砜節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter sulfonivorans

球孢枝孢拉丁屬名: Cladosporium  sphaerospermum
高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr412) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規(guī)格 0.1ml

HRP穩(wěn)定劑 10ml/100ml pH7.2，無蛋白成分

VPREB1 英文名稱： B淋巴細胞前體蛋白1 0.2ml

phospho-Dnmt1(Ser732) 英文名稱： 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 0.1ml

Anti-AIF 調(diào)亡誘導因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

ETNK2 英文名稱： 乙醇胺激酶2 0.2ml

神經(jīng)細胞粘附分子配體1 Anti-CD171/NCAM-L1 0.1ml

CD28 英文名稱： CD28 0.1ml

Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit 人專一抗原3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HCFHrp/BTA 膀胱抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MIP-1 Beta/CCL4 巨噬細胞因子1β  MIP-1β 規(guī)格 0.1ml

ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性激酶 96T

RING finger protein 189 英文名稱： 環(huán)指蛋白189 0.2ml

Anti-Casein 酪蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

魚孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒 英文名稱：PROG ELISA Kit 特價供應

規(guī)格:5*96孔圓環(huán)病毒IgGELISA試劑盒英文名稱：Elisa特價供應

植物25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 英文名稱：Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 特價供應

植物赤霉素（GA） ELISA試劑盒英文名稱：Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit特價促銷

植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒 英文名稱：Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 進口/原裝

TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞死因子α誘導蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CRYZL1 英文名稱： 醌氧化還原酶樣蛋白1 0.2ml

Anti-GRP78 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(熱休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 人干擾素誘導蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CXCL13/BCA1 B-淋巴細胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白 96T

Phospho-Raptor (Ser792) 英文名稱： 磷酸化mTOR相關調(diào)控蛋白 0.1ml