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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4297
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-07-01
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4297 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鹿源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 50T | LZR4297 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
玫瑰暗黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces roseofulvus
木賊鐮孢拉丁屬名: Fusarium equiseti
土壤短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas terrae
球孢白僵菌用途: 生物防治
熒光假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
解脂假絲酵母解脂變種拉丁屬名: Candida lipolytica var. lipolytica
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
微白黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus
奧斯陸莫拉氏菌拉丁屬名: Moraxella osloensis
暗產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
南方正青霉拉丁屬名: Penicillium meridianum
食酸戴爾福特菌拉丁屬名: Delftia acidovorans
薛瓦酵母拉丁屬名: Saccharomyces chevalieri
甜菜假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas bei
蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種用途: 制備抗原標(biāo)準(zhǔn)菌株，毒殺鱗翅目昆蟲
鹿源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK 規(guī)格 0.1ml
品名 規(guī)格 備注
ZBTB38 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB38 0.2ml
Desmocollin 1 英文名稱： 橋粒糖蛋白1 0.1ml
S100A7 S100A7 兔單抗 (FITC) Human
CD62L 英文名稱： L選擇素 0.1ml
Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FOXO1 叉頭蛋白O1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 規(guī)格 1ml
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素 96T
Semaphorin 5A 英文名稱： 跨膜蛋白SEMA5A 0.2ml
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 英文名稱： 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白 0.1ml
Anti-ANG-2/FITC 熒光素標(biāo)記生成素-2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD163/M130/FITC 熒光素標(biāo)記CD163IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
HBsAg 表面抗原 96T
Msx2 英文名稱： 同源盒基因Msx2 0.2ml
Cullin 2 英文名稱： Cullin2 0.2ml
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶IIMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MIF 巨噬細(xì)胞移動抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IRAK4 白介素-1受體相關(guān)激酶4 規(guī)格 0.2ml
HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人病毒X蛋白相互作用蛋白 96T
PCDHGA5 英文名稱： 原鈣粘蛋白γA5 0.2ml
