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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4308
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-05-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4308 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4308 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
魯氏接合酵母拉丁屬名: Zygosaccharomyces rouxii
日本曲霉拉丁屬名: Aspergillus japonicus
豬絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae
大腸桿菌屬拉丁屬名: Escherichia coli
聚生殼菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
四川散斑殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
居真菌細(xì)菌拉丁屬名: Mycetocola sp.
球孢白僵菌拉丁屬名: Beauveria bassiana
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
南極假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas antarctica
新疆鹽地桿菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
凝結(jié)芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus coagulans
印度洋斯塔普氏菌拉丁屬名: Stappia indica
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商山羊抗小鼠 IgG(H+L)/AP 0.1ml 美國(guó)Jackson公司分裝
VSV-G tag 英文名稱： VSV-G tag標(biāo)簽 0.1ml
DLST 英文名稱： DLST蛋白 0.2ml
Anti-Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ERK4 英文名稱： 原活化蛋白激酶4 0.1ml
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體 Anti-NGF-R/p75NTR/CD271 0.1ml
Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CD80 英文名稱： CD80 0.2ml
Anti-HSP22 熱休克蛋白-22Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Human CA724 ELISA Kit 人標(biāo)志物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HGF 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MHC class I 組織相容性復(fù)合體1多肽 規(guī)格 0.1ml
PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酪酸磷酸酶 96T
RIT1 英文名稱： RIT1蛋白 0.2ml
cellulase 英文名稱： 纖維素酶 1ml
Anti-CD14 內(nèi)毒素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse omentin ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vitamin B6,VB6 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vitamin C,VC ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CX3CR1 英文名稱： 趨化因子受體1 0.1ml
Anti-IL1RAPL1 白介素1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LKM(Human liver kidney microsome autoantibody) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-29/IFNL1 白細(xì)胞介素29Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRRC2 LRRC2蛋白 規(guī)格 0.2ml
VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸 96T
phospho-RPS6KB1(Ser427) 英文名稱： 磷酸化核糖體S6蛋白激酶 0.1ml
