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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
小鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4323
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-07-01
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4323
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

規格

貨號

小鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

50T

LZR4323

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

球黑孢菌拉丁屬名: Khuskia oryzae H.J. Huds.

異常畢赤酵母拉丁屬名: Pichia anomala

蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen

水稻紋枯病(立枯絲核菌)拉丁屬名: Thanatephorus cucumeris

黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus  niger

阪崎氏年輕泰坦桿菌(阪崎克羅諾桿菌) 拉丁屬名: Cronobacter  sakazakii

亮白曲霉拉丁屬名: Aspergillus  candidus

戊糖乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus pentosus

嗜熱脂肪地球芽胞桿菌拉丁屬名: Geobacillus   stearothermophilus

克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Candida  krusei

葡枝根霉拉丁屬名: Rhizopus  stolonifer

臘狀芽胞桿菌用途: 產蛋白酶

大腸埃希菌拉丁屬名: coli

土味鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces odorifer
小鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書IL-2 ELISA KIT 小鼠白介素2 96T

TSHB 英文名稱: 小鼠抗促甲狀腺素 0.1ml

C6orf57 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框57 0.2ml

Anti-Phospho-Met (Tyr1349) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)Multi-class antibodies規格: 0.1ml

小鼠8異素(8-iso-PG)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit進口/分裝

小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA Kit進口/分裝

小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit特價供應

CDC16 英文名稱: 細胞分裂周期蛋白16 0.2ml

Anti-Phospho-cdc2 (Thr14) 磷酸化周期素依賴激酶2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

TPO(Thyroid Peroxidase) 甲狀腺過氧化物酶(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25CMulti-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh ORP8 氧化固醇結合蛋白8 規格 0.2ml

IGFBP7 Kit Human 人 IGFBP7 ELISA配對 ELISA

phospho-TRIM25(Ser100) 英文名稱: 磷酸化雌激素反應指狀蛋白 0.1ml

PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 尿激酶型纖溶酶原激活因子(多肽)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-AVPR2 精氨酸加壓素受體2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AKT2 (Ser474) 磷酸化蛋白激酶B2 規格 0.1ml

Myeloperoxidase 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UGDH 英文名稱: 尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶 0.2ml

DNAJC3 英文名稱: 干擾素誘導蛋白p58ipk 0.1ml

Anti-AVPR2 精氨酸加壓素受體2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

CYBR1 英文名稱: 細胞色素B還原酶1 0.2ml

Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白Multi-class antibodies規格: 1ml

Human desmin,Des ELISA Kit 人結蛋白Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-SSB/La 干燥癥SSB/LaMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/Bio 生物素標記的羊抗人IgM 規格 0.1ml

Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關磷脂酶A2 96T

Proprotein Convertase 2 英文名稱: 神經轉化酶2 0.1ml

 


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