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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 人Wilms細(xì)胞；G401

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞來源于一名3個(gè)月大的*的腎Wilms瘤，由于該類分類的改變，經(jīng)Garvin等鑒定后發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞來源于腎橫紋肌樣瘤。該細(xì)胞分泌腎母細(xì)胞生長因子（nephroblastgrowthfactor，NB-GF)。

培養(yǎng)條件: McCoy＇s5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代；3~4天1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

膜區(qū)抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HCVEA-246形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Human BMP-9 ELISA KIT

抗合胞病毒單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；RSV-4C1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Human PDGF-BB ELISA KIT

抗戍型肝炎病毒單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株；HEV-4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Rabbit IL-1b ELISA Kit

小鼠胚胎細(xì)胞；SC-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human IL-18 Bpa ELISA KIT

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆；L-929[L929]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human VEGF R1 ELISA KIT

非洲綠猴腎細(xì)胞；CV-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Mouse AXL ELISA KIT

人非小細(xì)胞細(xì)胞；H125形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞生長特性: 貼壁生長Mouse IL-19 ELISA KIT

人臍內(nèi)皮細(xì)胞；HUV-EC形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human VEGF R2 ELISA KIT

人慢性髓系細(xì)胞；K562形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣；圓形生長特性: 懸浮生長Rabbit IL-10 ELISA Kit

IL-2依賴的人淋巴T細(xì)胞系；Kit225－k6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Human EMMPRIN ELISA KIT

人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474形態(tài)特性: 上皮樣；圓形、成團(tuán)生長特性: 貼壁生長Human CD8A ELISA KIT

黑人Burkitt細(xì)胞；Raji形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Human Eotaxin-3 ELISA KIT

人急性髓性細(xì)胞；KG-1a形態(tài)特性: 細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Mouse BMP-9 ELISA KIT

人結(jié)細(xì)胞；DiFi形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human CD14 ELISA KIT

小鼠纖維細(xì)胞；WEHI-13VAR形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁及懸浮生長Mouse Granzyme B ELISA KIT

人T淋巴細(xì)胞細(xì)胞；C8166形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Human Vitronectin ELISA KIT
人Wilms細(xì)胞；G401說明書纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒ALCAMELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

性因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒ALDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒ALDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒ALDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒ALDHELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒ALGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒ALKELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒ALOX-5ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。