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細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3)；PA12

形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞來自NIH/3T3，可作逆轉(zhuǎn)錄病毒的包裝細(xì)胞。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代；3~4天1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

人外周血B淋巴細(xì)胞；IM-9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Mouse GAS6 ELISA KIT

人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞；NK-92MI[NK92MI]形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長羊白介素6（Sheep IL-6）Elisa試劑盒

人腺癌細(xì)胞；SK-HEP-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human GFAP ELISA KIT

人細(xì)胞；TKB-1形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human pro-BDNF ELISA KIT

人胚；WI-38[WI38]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Rabbit BMP5 ELISA Kit

非洲綠猴腎細(xì)胞；GL-37形態(tài)特性: 生長特性: 貼壁生長Human CD258 ELISA KIT

人細(xì)胞；HHCC形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Chicken IL-10 ELISA Kit

人胎兒胸腺細(xì)胞株；HFT-8810[HFT8810]形態(tài)特性: 生長特性: 貼壁生長Human SCGN ELISA KIT

人細(xì)胞；HB611形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human BMP-4 ELISA KIT

小鼠細(xì)胞；P388形態(tài)特性: 生長特性: 貼壁生長Human NGF R ELISA KIT

人臍內(nèi)皮細(xì)胞（人細(xì)胞污染）；ECV-304[ECV304；ECV304]形態(tài)特性: 生長特性: 懸浮生長Human BMP-5 ELISA KIT

牛腎細(xì)胞；MDBK(NBL-1)形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human UPAR ELISA KIT

人細(xì)胞；PLC/PRF/5形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Human NT-3 ELISA KIT

牛陀螺狀細(xì)胞；BT形態(tài)特性: 生長特性: 貼壁生長Human FGFR2 ELISA KIT

恒河猴腎細(xì)胞；LLC-MK2形態(tài)特性: 生長特性: 貼壁生長Mouse IL-33R ELISA KIT

人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞；RD形態(tài)特性: 梭型和大的多核細(xì)胞生長特性: 貼壁生長Mouse IgG3 ELISA KIT
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3)；PA12供應(yīng)商二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒AMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒AMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒AMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒AMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒AMAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒AmylinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒ANAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒ANAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。