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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;KLE說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZX6754
  • 發(fā)布日期: 2020-12-01
  • 更新日期: 2025-07-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZX6754
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 上皮樣;多角
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產(chǎn)品名稱

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;KLE說明書

生長特性

貼壁生長

貨號

LZX6754

細(xì)胞名稱 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;KLE

形態(tài)特性: 上皮樣;多角

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系源自一名64歲白人女性的子宮內(nèi)膜組織,由GRRichardson于1984年建系。細(xì)胞染色體為非整倍體,數(shù)目范圍在51-66之間。裸鼠植瘤后,其標(biāo)本在電鏡下顯示,細(xì)胞間見緊密相連,細(xì)胞表面具有微絨毛。其形態(tài)特征與孕激素刺激后的子宮內(nèi)膜相似。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C11

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 

 

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

注意事項(xiàng):

1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Homo sapiens, human

Epichloe elymi Schardl et Leuchtmann

Pholiota spectabilis Fries

Penicillium aurantiogriseum var.viridicat ..

Agrobacterium sp.

Homo sapiens, human

Homo sapiens, human

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..

Homo sapiens, human peripheral blood

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..

Lactobacillus leichmannii (Henneberg) Berge ..

Eurotium tonophilum Ohtsuki, teleomorph

frozen

Staphylotrichum coccosporum Nicot et Meyer

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..

freeze-dried
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;KLE說明書甲基綠規(guī)格:5g用途:微生物指示劑

葡萄糖肉湯規(guī)格:250g用途:用于營養(yǎng)苛求菌培養(yǎng)和腸道菌產(chǎn)氣實(shí)驗(yàn)

LB肉湯規(guī)格:250g用途:用于分子生物學(xué)中大腸桿菌的培養(yǎng)

多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

3%NaCl蔗糖規(guī)格:20支詳情介紹

纖維素剛果紅培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于檢測纖維分解微生物

 


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