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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 大額牛腎細(xì)胞；BFR-K1

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性新生大額牛的腎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次

傳代情況: P2

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

接觸蛋白1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞；786-O[786-0]形態(tài)特性: 上皮樣Contactin 1

結(jié)核桿菌IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；CFPAC-1形態(tài)特性: 上皮樣anti-tubercle bacilli antobody IgG

解脲脲原體抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人腎透明細(xì)胞癌；Caki-1形態(tài)特性: 上皮樣Ureaplasma urealyticum antibody

解整合素樣金屬蛋白酶12檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人細(xì)胞；EC109形態(tài)特性: 上皮樣A Disintegrin And Metalloprotease 12

解整合素樣金屬蛋白酶9檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT-15[HCT15]形態(tài)特性: 上皮樣A Disintegrin And Metalloprotease 9

金黃色葡萄球菌腸毒素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人細(xì)胞；MDA-MB-468形態(tài)特性: 上皮樣Staphylococcal Enterotoxin

金黃色葡萄球菌腸毒素A檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠漿細(xì)胞瘤；MPC-11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Staphylococcal Enterotoxin A

金黃色葡萄球菌蛋白A檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胚胎心肌組織來源細(xì)胞；CCC-HEH-2形態(tài)特性: Staphylococal Protein A

金葡菌腸毒素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；LS174T[LS174T]形態(tài)特性: 上皮樣staphylococcus aureus ent

經(jīng)元細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)基因9檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人細(xì)胞；NCI-H1650形態(tài)特性: 上皮樣Neural Precursor Cell Expressed, Developmentally Down-Regulated 9

精氨酸加壓素；抗激素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人非小細(xì)胞；NCI-H1975形態(tài)特性: 上皮樣arginine vasopressin

精子蛋白17檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人小細(xì)胞；NCI-H2227形態(tài)特性: 上皮樣sperm protein 17

精子相關(guān)抗原9檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人非小細(xì)胞；NCI-H2087形態(tài)特性: 上皮樣SPAG9

巨噬細(xì)胞刺激蛋白α檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人非小細(xì)胞細(xì)胞；NCI-H23形態(tài)特性: 上皮樣macrophage-stimulating proteinα

巨噬細(xì)胞清道夫受體1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺腺鱗癌細(xì)胞；NCI-H596形態(tài)特性: 上皮樣Macrophage Scavenger Receptor 1

巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人非小細(xì)胞細(xì)胞；NCI-H838形態(tài)特性: 上皮樣Macrophage Inflammatory Protein-1α

聚集蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞；TALL-104形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Agrin
大額牛腎細(xì)胞；BFR-K1規(guī)格Honda氏產(chǎn)毒肉湯規(guī)格：250g用途：用于大腸埃希氏菌的產(chǎn)毒培養(yǎng)

瓊脂粉(組培專用)規(guī)格：用途：

萬古霉素溶液（4mg）規(guī)格：1ml*5拉丁屬名：萬古霉素溶液（4mg）

葡萄球菌選擇性瓊脂規(guī)格：250g用途：用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)

0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于PBS）規(guī)格：100mL詳情介紹

奈替米星藥敏紙片規(guī)格：30ug/片，20片/瓶拉丁屬名：Netilmicin（NET）