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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 盤羊皮膚細(xì)胞；ASHS2

形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雌性盤羊的耳組織。1997年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%FBS

傳代方法: 1:2傳代；3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

CD2關(guān)聯(lián)蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人雜交細(xì)胞；2F7形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣CD2 Associated Protein

轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族C成員6檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；FZ201形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily C, Member 6

γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人纖維細(xì)胞系；JH-2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣gamma glutamyl transpeptidase 2

雌酮1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人細(xì)胞；CelllineoflymphPenarusmonodon形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Estrone 1

TP53誘導(dǎo)糖酵解凋亡調(diào)節(jié)蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 倉鼠腎細(xì)胞；HL-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣TP53 Induced Glycolysis And Apoptosis Regulator

嗜中性粒細(xì)胞過氧化氫酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；13D8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Neutrophil Hydrogen Peroxidase

肽基脯氨酸異構(gòu)酶酶FKBP25抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；6A3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣FKBP25

E6AP；p53泛素化檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；3H5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣E6AP；p53 Ubiquitination

信號素3G檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；RH1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣SEMA3G

小泛素相關(guān)修飾蛋白1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；BDRPDP形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Small Ubiquitin Related Modifier Protein 1

抗RNA聚合酶Ⅲ抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 鼠舌黏膜鱗癌細(xì)胞；Rca-T形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣RNAPⅢ

病毒前S2抗原檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；D12E9F11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣HBV preS2Ag

肽基脯氨酸異構(gòu)酶酶FKBP25檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胚胎干細(xì)胞；SH.hEXl(46.xx)形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣FKBP25

鈣鎂ATP酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；N-176-15形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase

異常蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；MabHS1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Tumorabnormalprotein

普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；MF4C4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣PHLDA2

VI型膠原蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZUB1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Collagen TypeVI
盤羊皮膚細(xì)胞；ASHS2規(guī)格無鹽胨水規(guī)格：10支/盒用途：用于副溶血性弧菌的生化鑒定

42℃生長生化管規(guī)格：10支/盒用途：用于副溶血性弧菌的生化鑒定（SN）。

棉子糖發(fā)酵管a規(guī)格：用途：用于大腸桿菌O157和志賀氏菌的生化鑒定。

大腸埃希氏菌O157:H7/NM生化鑒定試劑盒（SN）規(guī)格：12支/盒用途：用于大腸埃希氏菌O157:H7/NM的生化鑒定。

三糖鐵生化管規(guī)格：10支/盒用途：用于沙門氏菌、大腸桿菌、單增李斯特氏菌和志賀氏菌的生化鑒定。

安潔清4號實驗室玻璃器皿專用洗滌劑規(guī)格：10L/桶用途：用于實驗室玻璃器皿的頑固性污染物的清洗。