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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;MCF7-Cas9-543說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZX7314
  • 發(fā)布日期: 2020-12-03
  • 更新日期: 2025-07-14
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZX7314
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 上皮樣
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產(chǎn)品名稱

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;MCF7-Cas9-543說明書

生長特性

貼壁生長

貨號(hào)

LZX7314

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;MCF7-Cas9-543

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單,經(jīng)WesternBlotting驗(yàn)證該可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;400ug/mlG418

傳代方法: 1:3~1:6傳代;每周2~3次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 

 

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

注意事項(xiàng):

1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
O型口蹄疫檢測(cè)試劑盒Foot-and-mouth disease virus O

胃抑素檢測(cè)試劑盒gastric inhibitory polypeptide

O型口蹄疫VPI抗體檢測(cè)試劑盒O type foot-and-mouth disease virus VPI antibody

堿性成纖維細(xì)胞生長因子2檢測(cè)試劑盒basic fibroblast growth factor 2

支原體抗體檢測(cè)試劑盒Mycoplasma antibody

脂肪酸檢測(cè)試劑盒fatty acid

小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒peste des petits ruminants

硫代巴比土酸反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)試劑盒TBARS

藍(lán)舌病檢測(cè)試劑盒bluetongue

20羥二十烷四烯酸檢測(cè)試劑盒20-hydroxyeicosatetraenoic acid

胰蛋白酶原檢測(cè)試劑盒trypsinogen

糜蛋白酶原檢測(cè)試劑盒Chymotrypsinogen

程序性死亡-1抗體檢測(cè)試劑盒PD-1Ab

程序性死亡因子配體1抗體檢測(cè)試劑盒PDL1-Ab

凝血因子XIII檢測(cè)試劑盒coagulation factor ⅩⅢ

8異素檢測(cè)試劑盒8-iso-PG

單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒Monocyte chemotactic protein 1
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;MCF7-Cas9-543說明書千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷36948-76-2中文別名:木蝴蝶素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷; 木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷;千層紙素-7-葡萄糖醛酸苷  

英文名:Oroxyloside  

英文別名:Oroxylin A 7-O-glucuronide  

CAS登錄號(hào):36948-76-2

分子式:C22H20O11

分子量:460.39

分子結(jié)構(gòu):

外觀:黃色粉末

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源:紫葳科木蝴蝶(Oroxylum indicum)

溶解性:溶于、乙醇、水等,不溶于等溶劑。

熔點(diǎn):199-201 ℃

:具有一定的抗氧化作用。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年

 


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