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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
Cas9穩定表達的人惡性細胞;A375-Cas9-575說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZX7346
  • 發布日期: 2020-12-04
  • 更新日期: 2025-07-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯祖
貨號 LZX7346
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態 上皮樣
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態 貼壁生長
物種來源 詳見說明書
包裝規格
純度 %
是否進口

特別聲明:本產品及我公司所售其他產品均為科研類試劑產品,嚴禁用于藥物、醫療及其他非科研用途。

產品名稱

Cas9穩定表達的人惡性細胞;A375-Cas9-575說明書

生長特性

貼壁生長

貨號

LZX7346

細胞名稱 Cas9穩定表達的人惡性細胞;A375-Cas9-575

形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單,經WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/mlG418

傳代方法: 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

 

 

傳代方法:

產品僅用于科研收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:

1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

注意事項:

1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

 

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)產品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
P450膽固醇側鏈裂解酶檢測試劑盒Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme

α干擾素檢測試劑盒Interferon α

α酮戊二酸脫氫酶檢測試劑盒α ketoglutarate dehydrogenase

γ-谷氨酰轉肽酶檢測試劑盒γ-glutamyl transpeptidase

δ氨基乙酰丙酸脫水酶檢測試劑盒δ-Aminolevulinic Acid Dehydratase

白細胞介素1檢測試劑盒Interleukin 1

白細胞介素1β檢測試劑盒Interleukin 1β

白細胞介素6檢測試劑盒Interleukin 6

白細胞介素8檢測試劑盒Interleukin 8

表皮生長因子檢測試劑盒Epidermal growth factor

丙二醛檢測試劑盒malondialchehyche

丙酮酸羧化酶檢測試劑盒pyruvate carboxylase

補體蛋白3檢測試劑盒Complement 3

補體蛋白4檢測試劑盒Complement 4

超敏C反應蛋白檢測試劑盒high sensitivity C-Reactive Protein

垂體腺苷酸環化酶激活肽檢測試劑盒pituitary adenylate cyclase activating polypeptide

雌二醇檢測試劑盒Estradiol
Cas9穩定表達的人惡性細胞;A375-Cas9-575說明書琥珀酸110-15-6中文別名:丁二酸  

英文名:Succinic acid  

英文別名:Amber acid  

CAS登錄號:110-15-6

分子式:C4H6O4

分子量:118.09

分子結構:

外觀:白色結晶

規格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:松屬植物的樹脂久埋于地下而成的琥珀

溶解性:溶于水,微溶于乙醇、、、甘油。

熔點:185 ℃

:具有抗菌、中樞抑制、、等作用。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年

 


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