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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱(chēng) 人急性早幼粒細(xì)胞；HL-60

形態(tài)特性: 髓母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞由CollinsSJ從一位患有急性早幼粒細(xì)胞性的36歲白人女性的外周血中分離建立；可自發(fā)分化，或在丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1%to1.5%)、放線菌素D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化；PMA刺激后可分泌TNF-α。該細(xì)胞具有吞噬活性和趨化反應(yīng)，癌基因myc陽(yáng)性，表達(dá)補(bǔ)體受體和FcR。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

傳代方法: 維持細(xì)胞濃度在1×105~1×106/ml,每2~3天換液1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類(lèi)試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

(R)羥基鹽... DMannose 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體

3羥基雜環(huán)鹽... NOctanoylNmethylglucamine 質(zhì)量規(guī)格：≥97% ,進(jìn)分核內(nèi)切酶G抗體

2,5二... NDecanoylNmethylglucamine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR真核翻譯起始因子2C1抗體

S異脲鹽 nOctylβDThioglucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRE1A樣分化抑制因子3抗體

DL高半胱內(nèi)... D(+)Raffinose pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR骨骼肌醇化酶抗體

4鹽鹽 DSorbitol 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR嗜性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶抗體

1H唑脒鹽鹽 NOctylβDglucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格：>98%,用于蛋白分析胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體

異煙鹽鹽 L(+)Ribose 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR化eIF4E結(jié)合蛋白抗體

美海屈林二鹽 L(+)Ribose 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品MYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體

美金剛鹽鹽 2DeoxyLribose 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

3,4二肼鹽鹽 4MethylumbelliferylβDxylopyranoside Printable Reviews 質(zhì)量規(guī)格：0.99內(nèi)皮脂肪酶抗體

4羧基肼鹽鹽 2DeoxyDRibose 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR化4E結(jié)合蛋白1抗體

3溴肼鹽鹽 DGalactose 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體

2溴肼鹽鹽 DGalactose 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體

3肼鹽鹽 Hydrazine dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：>98%EB病毒核抗原3B抗體

4肼鹽鹽 Hydroxyapatite 質(zhì)量規(guī)格：>99%,粒徑20nm內(nèi)皮素B受體抗體

4基肼鹽鹽 Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M 質(zhì)量規(guī)格：粘度112501000mPas附睪蛋白酶抑制蛋白
人急性早幼粒細(xì)胞；HL-60供應(yīng)商Amoxicillin　阿莫西林/羥氨芐青霉素　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Amoxicillin　阿莫西林（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Fenofibrate　非諾貝特　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Fenofibrate　非諾貝特（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Probenecid　丙磺舒　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Probenecid　丙磺舒（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Norfloxacin　諾氟沙星　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Norfloxacin　諾氟沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

NorfloxacinHCl　諾氟沙星鹽酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

NorfloxacinHCl　諾氟沙星鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Indometacin　吲哚美辛　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Indometacin　吲哚美辛（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Cimetidine　西米替汀　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Cimetidine　西米替汀（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

Adefovirdipivoxil　阿德福韋/阿德福韋酯　質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)