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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 人B淋巴細(xì)胞；WIL2-S[WIL2S]

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 不分泌免疫球蛋白,HAT敏感。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清，10%

傳代方法: 2x10-5細(xì)胞/ml

傳代情況:

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

莧菜紅　915673　10g腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體(C端)

肽酶抑制劑　100938101　1mg化纖維束蛋白同源物1抗體

四氧嘧啶（阿脲）　125952　5gFBXW5蛋白抗體

尿囊素　97596　25gFBXW12蛋白抗體

性蛋白酶（1：200000）　9001789　5gFBXO42蛋白抗體

藍(lán)6B鈉鹽　1324807　25gFBXO28蛋白抗體

茜素黃R　2243767　25g雞白痢、雞傷寒抗體

茜素黃GG　584429　25g富含脯的酪激酶2抗體

茜素紅S　130223　5gFAM135B蛋白抗體

茜素絡(luò)合指示劑　3952781　1g口蹄疫病毒A型抗體(N端)

脫酶　9031725　15ku骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體

海藻　9005327　100g腎刷狀緣抗體

海藻鈉　9005383　100g神經(jīng)元核抗原抗體

阿利新藍(lán)（阿爾新藍(lán)）　33864992　1g促卵泡刺激素抗體

卵清蛋白　9006591　25g濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白抗體

β　107959　100g纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子13抗體

L　56417　25g凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)
人B淋巴細(xì)胞；WIL2-S[WIL2S]說明書Acetylsalicylicacid　鄰乙酰水楊酸/阿司匹林(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Orlistat(Fermentation)　奧利司他（發(fā)酵）　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Orlistat(Fermentation)　奧利司他（發(fā)酵）　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Nicardipinehydrochloride　鹽酸尼卡地平　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Nicardipinehydrochloride　鹽酸尼卡地平（標(biāo)準(zhǔn)品）　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Montelukastsodium　孟魯司特鈉　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Montelukastsodium　孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

β-Glucanase　β-葡聚糖酶　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

telbivudine　2-脫氧-L-胸苷/替比夫定　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

telbivudine　替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane　輪環(huán)藤寧/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Raltitrexed　雷替曲塞　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

L-OrnithineL-aspartatesalt　L-鳥氨酸L-天門冬氨酸鹽　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Dipyridamole　雙嘧達(dá)莫　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Tamibarotene　他米巴羅汀　質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR