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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;PC-3-Cas9-578規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZX9318
  • 發(fā)布日期: 2020-12-17
  • 更新日期: 2025-07-01
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZX9318
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 上皮樣
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 A型
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;PC-3-Cas9-578

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長

特征特性: 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單,經(jīng)WesternBlotting驗證該可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: F12K10%FBS;400ug/mlG418

傳代方法: 1:3~1:6傳代;每周2~3次換液。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 


特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

產(chǎn)品名稱

Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;PC-3-Cas9-578規(guī)格

生長特性

貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長

貨號

LZX9318

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

 

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
注意事項:

1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

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Cas9穩(wěn)定表達的人細胞;PC-3-Cas9-578規(guī)格正常子宮內(nèi)膜細胞;RNEEC/HL-036RatNormalEndocervicalEpithelialCellsRNEEC/HL-036Anti-TriMethyl-Histone H4-K20 Polyclonal Antibody 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

兔正常氣管上皮細胞;RNTEC/HL-035RabbitNormalTrachealEpithelialCellsRNTEC/HL-035Anti-RAD17 Polyclonal Antibody 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

細胞;HLCC/HL-023HumanLungCancerCellsHLCC/HL-023Anti-RBP4 Polyclonal Antibody 上皮樣生長特性: 貼壁生長特征特性: 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

 


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